锌指核酸酶技术
锌指核酸酶技术
锌指核酸酶技术是一项旨在实现染色体脱氧核糖核酸定向重组的技术。这项技术的设计核心是将特异性识别模块和功能模块相结合,其中特异性识别模块采用能特异性识别三联体DNA片段的锌指基序。
原理
特异性DNA识别结构域
锌指核酸酶技术的一个显著特点是使用能够特异性识别三联体DNA片段的锌指基序作为识别特定DNA序列的基本单位。相较于传统的碱基识别方法,锌指基序不仅在思路上有突破,而且具有更高的稳定性和更好的可操作性。锌指核酸酶的特异性作用得益于锌指结构与脱氧核糖核酸之间的强亲和性。
DNA重组功能结构域
典型的锌指核酸酶是由非特异性的核酸内切酶FokI与含锌指的结构域融合而成,目的是对特定序列进行切割。切割后,通过切除修复机制,单链部分被删除并重新连接,从而实现对染色体上特定片段的删除。
应用前景
锌指核酸酶技术自诞生以来一直受到Sangamo生物公司的控制,该公司仅与少数科研机构合作。然而,J. Keith Joung领导的研究团队提出了一种开放式的锌指核酸酶制造方法,并建立了包含多种锌指的数据库,这一举措打破了Sangamo生物公司的垄断地位。尽管锌指核酸酶技术尚未广泛应用于临床,但它已经显示出巨大的潜力,尤其是在基因治疗领域的应用。
价值与影响
锌指核酸酶技术的发展为我们提供了靶向性重组人类基因组的可能性,这对于将大量的基础研究成果转化为实际的基因治疗方法至关重要。虽然从理解基因组到重组人类基因治疗疾病的过程充满挑战,但锌指核酸酶技术的贡献为这一过程的关键环节提供了支持。
目录
概述
原理
特异性DNA识别结构域
DNA重组功能结构域
应用前景
价值与影响
参考资料