土屋昌次（1544年-1575年），原名金丸筑前守虎义的次子，幼名平八郎，是战国时代武将
武田信玄的“奥近习六人众”之一。他在多次战役中表现出色，被武田信玄赏识并继承了
武田氏的名族土屋氏，正式改名为土屋昌次。
土屋昌次的初次参战是在第四次川中岛合战，当时他年仅十七岁。在这场战役中，他负责守卫信玄的本阵，始终坚守阵地，未曾后退。这场战役之后，昌次因表现出色被信玄要求继承武田氏的名族土屋氏并正式改名为土屋昌次。
在三方原合战中，土屋昌次接受了德川氏大将
鸟居元忠的一骑讨，并成功击败了鸟居元忠。他对信玄极其忠诚，信玄病死之后，曾有意殉死，但被
高坂昌信劝阻。
长篠合战中，土屋昌次与
穴山信君、
马场信房、
真田信纲、
真田昌辉、
一条信龙等人率领三千骑兵的武田军右翼队。他们面对
织田信长的三千支铁炮，虽然突破了第二道防马栅，但最终被铁炮挡在了最后一道防马栅之后。在突破马防栅冲锋攻击时，土屋昌次与随山县昌景一同被铁炮击中身亡，时年仅三十二岁。