波音737-300是于1981年3月正式开始研制，1983年中开始总装，1984年1月第一架原型机出厂，同年2月24日首次试飞，11月28日首次交付使用。

由于新一代737NG投产，第二代737于2000年停产。最后一架737-300型于2000年交付。

波音737-300型为第二代的波音737，是波音737-300/-400/-500系列的标准型，-300型机身比波音737-200型加长2.64米（机翼前机身加长1.12米，机翼后机身加长1.52米，共加长2.64米），改用高涵道比的CFM-56涡轮风扇发动机，噪音和经济性得到大大改善，而且推力比第一代737所使用的JT8D更高，采用新型电子仪表（EFIS=Electronic Flight Instrumentation System，即「电子飞行仪表系统」）。

2017年5月8日，在中国国内执飞的最后一架波音737-300客机（编号为B-2959，中国南方航空公司）在郑州国际机场退役，该型号客机亦正式告别中国民航市场。

这架编号为B-2959的波音737-300型客机，1996年开始在郑州服役。8日是该机在中国最后一次执行航班飞行任务，早上7时35分它从郑州机场起飞到杭州市，又从杭州返回郑州，在郑州国际机场落地。

这架飞机系中国南方航空公司租赁的飞机，已在中国南方航空河南公司服役20多年。该机停飞后，需要办理退租手续，之后再调机美国。

波音737-300型客机从1990年到2014年1月份，共发生20次重大事故，导致714人死亡。

1997年5·8深圳南航空难

1997年5月8日，中国南方航空公司，执行重庆市至深圳3456航班中国南方航空有限公司深圳公司波音737—300型CZ3456号飞机，在着陆过程中失事。机上旅客65人，死亡33人，空勤组9人，死亡2人。

1990年马尼拉空难

1990年5月11日，菲律宾航空，注册号码为EI-BZG的波音737-300型客机，准备执行从马尼拉到伊洛伊洛的航班，当地温度为95华氏度，35摄氏度，飞机停在机场时，发生燃油蒸气爆炸，导致飞机上8名乘客死亡。

1991年洛杉矶空难

1991年2月1日，美国航空公司，注册号为N388US的波音737-300型客机，执行从哥伦布到洛杉矶的1493航班，在当地时间18：07分降落时，意外撞上了机场的消防站，导致机上86人中，包括2名机组成员在内的22人死亡。

1992年桂林空难

1992年11月24日，中国南方航空公司，注册号B-2523的波音737-300型客机，从广州市飞往桂林机场，降落过程中，飞机失控，在位于机场20公里外撞山。导致机上141人死亡。

1988年新墨西哥湾空难

1988年5月24日由中美洲航空公司执行的110号航班在新墨西哥湾失去动力，最后在岸堤旁成功降落机上38名乘客，1名空乘人员无一伤亡，全部逃生。

2021年5月14日，美国联邦航空局要求波音公司对所有波音旧机型包括波音737-300/400/500，共143架飞机进行检查。此次调查是为了进一步了解1月份印尼坠机事故中，波音系列飞机可能存在的导线故障问题。受影响飞机的自动油门系统在运行中可能无法检测到此类故障，并造成安全隐患。波音公司于14日晚间回应称，将对旗下所有飞机的安全性能进行提升。