α-L-岩藻糖酶(AFU)是一种溶酶体酸性
水解酶,1980年
法国学者Deugnier等研究发现,AFU在诊断肝细胞癌中敏感性好,阳性率高,是AFP阳性率的三倍以上,对AFP阴性病例及小细胞肝癌的诊断价值极大,是早期
原发性肝癌诊断的有用指标。并被众多研究所证实。
AFU,主要参与含
岩藻糖基的各种
糖脂、糖蛋白、
糖胺聚糖等大分子物质的分解代谢。广泛存在于人体各组织
细胞溶酶体和
体液中。标本
血清、尿液、唾液、泪液等标本均可。标本应澄清,4℃保存3天,-20℃保存3个月,避免反复冻融。
溶血性贫血、
黄疸、
高脂血症、污染标本严重影响结果。
荧光法:利用AFU
水解4-
甲基伞型α-L-
岩藻吡喃糖苷,释放4-甲基伞型酮,用碱性缓冲液终止反应,并使产物呈现荧光,用360nm或365nm激发波长和400nm或448nm发射波长检测荧光强度,对照不同浓度4-甲基伞型酮制备的标准曲线求酶活性。此法敏感性高,最小检出限为0.06U/L。
比色法:以4-
1-溴-2-硝基苯α-L-岩藻吡喃糖苷为
底物经AFU水解释放4-
硝基苯酚,同样用碱性缓冲液终止反应,使4-NP呈显著黄色,在规定波长下读取吸光度A。用纯4-NP作标准,利用标准曲线或4-NP
摩尔吸光度计算出AFU活性。本法简便,设备要求不高,国内外广泛采用。
肝癌:
原发性肝癌患者
血清中AFU活性不仅显著高于正常对照,而且也显著高于
继发性肝癌、胆管细胞、恶性间皮瘤、恶性血管内皮细胞瘤、
肝硬化、先天性肝囊肿和其它良性肝占位性病变。对原发性肝癌诊断的阳性率为64%-84%,特异性达90%左右。通过对原发性肝癌、肝硬化患者进行AFU、AFP检测,发现原发性肝癌和肝硬化后肝癌患者AFU、AFP均增高,以AFP500ng/mL为诊断肝癌的临界值,其假阳性率为43%,AFU740nmol/(ml.h)为临界值,其敏感度为84%,特异性为94%。因此,
血清AFU对
原发性肝癌诊断有较高的敏感性和特异性。国内对24例肝细胞癌患者进行血清AFU和AFP相关研究,发现AFU诊断敏感必为87%,特异性为78%,而AFP则分别为65%和89%(诊断界限为,20ug/L)。提示AFU诊断的敏感性好,而特异性较AFP低。血清中AFU活性和阳性率与
肝癌直径大小无明显
相关性。
小肝癌组血清AFU阳性率70.8%显著高于AFP(37.5%)。AFP阴性和AFP升高而不足以诊断原发性肝癌者,其
血清AFU的阳性率达80.8%。肝组织
活检证实为
原发性肝癌者,血清AFU的阳性率为AFP阳性率的3倍以上。在
肝硬化患者中检测AFU,如其活性增加,对发现一些较小的肿瘤更具有价值,此时AFP不能对较小的肿瘤做出诊断。因此,应用和推广AFU作为原发性肝癌新的诊断指标,具有重要的意义,尤其是AFP阴性和小细胞肝癌的诊断价值更大。因与AFP无明显相关可互初诊断,联合检测可提高
肝癌的检出率。
妊娠与
卵巢肿瘤:研究表明,随妊娠周数增加
血浆AFU递增,在自然分娩或人工终止妊娠后,迅速下降,5天降到正常。卵巢癌患者
血清AFU活性降低,且与疾病分期、肿瘤负荷、
组织学分型和肿瘤分化程度无关。良恶性卵巢癌患者血清AFU活性降低可能与遗传因素有关。
81.2%的
原发性肝癌患者血清AFU水平增高,与AFP联合检测可提高原发性肝癌诊断阳性率达93.1%。