玛丽亚（英语：Maria of Austria，1528年6月21日-1603年2月26日），奥地利女大公，神圣罗马皇帝查理五世（Charles V, Holy Roman Emperor）与葡萄牙公主伊莎贝拉（Isabella of Portugal）之女，神圣罗马帝国皇帝马克西米利安二世（Maximilian II, Holy Roman Emperor）的妻子，神圣罗马帝国皇后，波希米亚王国和匈牙利王后。

1548年9月15日，玛丽亚嫁给堂兄马克西米利安二世，1548年至1551年期间夫妇两人共同担任西班牙摄政王。然而由于玛丽亚父亲查理五世与其胞弟费迪南一世在继承权问题上一直僵持不下。1550年马克西米利安二世从西班牙被召至奥格斯堡解决继承权问题。西班牙摄政王任期结束后，夫妇二人一起从西班牙回到马克西米利安父亲费迪南一世（Ferdinand I, Holy Roman Emperor）的宫廷。1558年，玛丽亚受哥哥腓力二世邀请回到马德里短暂摄政至1561年。1581年，玛丽亚同女儿玛格丽特返回西班牙，侍奉于马德里——德斯卡尔萨斯女修道院（Convent of Las Descalzas Reales）。1603年2月26日，玛丽亚在马德里去世，享年74岁。

1528年，玛丽亚在西班牙马德里出生。父亲是神圣罗马皇帝兼西班牙国王查理五世，母亲是葡萄牙的公主伊莎贝尔（Isabel of Portugal）。玛丽亚在家中排行第二，与哥哥腓力（Philip ，即后来的西班牙国王腓力二世）和妹妹乔安娜（Juana）一起在托莱多（Toledo）和巴利亚多利德（Valladolid）接受宫廷教育。

在哈布斯堡王朝争霸时代，玛丽亚的父亲查理五世统治着欧洲多块领地。为了争夺意大利和勃艮第领域，查理五世常年在外征战，因此与玛丽亚等孩子的相处时间较短。1539年，玛丽亚的母亲逝世，她们兄妹三人相依为命，虽然童年时期的玛丽亚与哥哥腓力以及妹妹乔安娜缺少父爱，但在母亲的教育下，他们仍对自己的父亲表示尊敬。

1548年9月15日，20岁的玛丽亚嫁给堂兄马克西米利安二世（其父为查理五世胞弟费迪南一世），以加强哈布斯堡家族两支脉络间的联系（详情参见腓力二世与费迪南一世继承关系）。这对夫妇在二十八年的婚姻中共有16个孩子，只有8个孩子活到成年。且由于两人父辈长期关于继承权的矛盾，以及夫妻间对宗教信仰态度的不同，致使玛丽亚与马克西米利安二世的关系有些疏远。

由于玛丽亚的母亲伊莎贝拉一世早逝，查理五世失去了他在拉蒙·卡斯蒂利亚领域的代理人。后来查理又要离开西班牙前往根特镇压宗教叛乱。于是他不得不让12岁的腓力在西班牙组成摄政委员会管理西班牙。1548年至1551年，由于腓力北上解决帝国政治问题，西班牙摄关政治之位空缺。于是查理五世便安排玛丽亚与马克西米利安二世接替西班牙帝国摄政王成为帝国代理人。但事实上，夫妻两人在西班牙并没有多少实权，所有的决策都要通过书信与查理五世进行协商。尽管如此，夫妇二人还是尽心尽力治理西班牙，包括建造城市水利工程，为西班牙普通民众谋取福利。然而西班牙王位继承者的争端愈演愈烈，1550年秋，费尔南多二世要求查理五世将儿子马克西米利安召至奥格斯堡以解决继承权问题。当时玛丽亚在西班牙正怀有身孕，所以马克西米利安前往奥格斯堡时并未带上她。次年春，玛丽亚才被丈夫马克西米利安从西班牙接回奥格斯堡市，随后二人开始投身于奥地利德国的事务管理，暂缓对西班牙的摄政代理。

1552年，玛丽亚夫妇迁至维也纳，并在马克西米利安父亲的宫廷居住，六年之后玛丽亚受哥哥邀请，回到马德里短暂摄关政治至1561年。1563年，玛丽亚的两个儿子（鲁道夫、恩斯特）被送往叔叔腓力二世·奥古斯都的宫廷，女儿们则由她亲自教导。1564年，马克西米利安二世接替父亲斐迪南一世成为神圣罗马帝国皇帝。同年，玛丽亚宣誓成为神圣罗马帝国皇后。马克西米利安二世亲近新教，而信奉天主教的哈布斯堡家族成员认为这样不适合天主教的传播，对培养帝国下一代的宗教信仰不利，因此哈布斯堡家族成员感到十分难堪。思虑再三，玛丽亚决定把孩子们送回天主教信仰更纯粹的西班牙。一是为了保证孩子们天主教信仰，二是让他们尽快熟悉家族主要财产和继承权问题。在奥地利，玛丽亚严格规定宫廷内的出入时刻，她教育孩子们遵守虔诚而正统的品格，告诫他们谨遵天主教教义。耳濡目染下，大女儿安娜在出嫁前曾希望进入修道院生活，二女儿伊丽莎白成为寡妇后在维也纳建立了女修道院并在那里度过余生。陪伴玛丽亚最久的女儿玛格丽特一世，早在马德里时就已经宣誓终生成为一名修女。

1576年，神圣罗马帝国皇帝马克西米利安二世逝世，而玛丽亚继续在奥地利宫廷内待了五年后，于1581年同女儿玛格丽特返回西班牙。1582年回到西班牙后，玛丽亚成为西班牙宫廷内的奥地利代表，成为腓力二世宫廷内相当有声望的女皇。1598年，哥哥腓力二世·奥古斯都去世。玛丽亚十分悲痛，其侄子（也是其外孙）腓力继位成为西班牙国王腓力三世。然而腓力三世听信宠臣莱尔马公爵弗朗西斯科·德桑多瓦尔·罗哈斯（西班牙语：Francisco de Sandoval y Rojas）的谗言，消极怠政。玛丽亚致力与女儿玛格丽特、外孙媳玛格丽特（腓力三世的妻子）一起组成了腓力三世宫廷内强大的天主教派和亲奥派以制衡莱尔马公爵，期间还成功说服腓力三世从1600年起为斐迪南提供财政支持，并促使其接纳自己的宗教建议。在处理完宫廷内政后，玛丽亚离开宫廷，与女儿玛格丽特一起进入马德里的德斯卡尔萨斯女修道院（Convent of Las Descalzas Reales）内生活。1603年，这位神圣罗马皇后在马德里去世，享年74岁。

入主德国后，玛丽亚在不完全信奉天主教的德国生活得十分不自在。她特意将身边的朝臣都换成笃信天主教的人员，还有许多贴身侍从都是她在西班牙的随侍，包括她最喜欢的西班牙侍女玛格丽塔·卡尔多纳（Margarita Cardona）。受其父长期支持天主教的影响，玛丽亚对天主教的信仰较为虔诚，因此她对新教实施的举措不太友好。（详见、），同时也由于丈夫对新教的态度亲和，而玛丽亚与之经常发生冲突。1557至1558年，费迪南一世就宗教信仰态度一事与儿子马克西米利安发生冲突。1559年7月，费迪南一世在新教传道士塞巴斯蒂安·普法索（Sebastian Pfauser，与马克西米利安二世交好）的布道中发现了三十八条有关异端的邪说，而此前，玛丽亚多次向查理五世、哥哥腓力提及丈夫的宗教信仰会导致帝国内部矛盾，甚至向费迪南提出“自己无法继续成为异教徒妻子”的请求。即便如此，玛丽亚却依旧选择劝说费迪南能够宽容对待自己的长子。

除了摄关政治宫廷，文学与艺术也颇受玛丽亚的喜爱。哈布斯堡家族中有许多集文韬武略与艺术修养为一体的前辈，玛丽亚的父亲查理五世就是其中之一。她也是西班牙著名作曲家托马斯·路易斯·德·维多利亚（Tomás Luis de Victoria）的赞助人，托马斯曾于1603年为玛丽亚的葬礼创作安魂曲。