活体染色是一种针对活细胞或组织的染色技术,旨在尽可能减少对样本的损伤。这种技术可以通过将染色剂注射入静脉、皮下或腹腔来进行活体观察,或者通过固定和切片来进行
显微镜检查。
活体染色包括体内活体染色和体外活体染色两种形式。体内活体染色指的是在生物体内进行的染色过程,而体外活体染色则是指将生物体的部分
细胞或组织分离出来后再进行染色。这两种方法的区别在于,体内活体染色在还原环境下进行,而体外活体染色则在氧化环境下进行。理想的活体染色剂应该能够特异性地染色目标结构,同时不对细胞、组织或生物体造成伤害。
活体染色的基本原理是选择具有专一性的染色剂,这些染色剂能够在不影响或最少影响细胞正常
生命活动的情况下,显示出细胞内的特定结构,如
线粒体、
细胞核等。常见的活体染色剂包括詹纳斯绿B(Janus green B),这是一种专门用于线粒体染色的试剂。它具有脂溶性和碱性性质,能够穿过细胞膜并与线粒体内膜上的负电荷部位结合。由于线粒体内的细胞色素氧化酶能使结合的
詹纳斯绿保持氧化状态,从而呈现出蓝色。
活体染色可以提高“植物细胞的质壁分离与复原”实验的效果。传统教材中建议使用
紫色洋葱作为实验材料,但由于难以取得单层
细胞的观察材料,实际操作时可能会影响观察效果。经过实践探索,发现对洋葱内表皮进行活体染色后,再进行质壁分离和复原实验,可以获得更好的实验效果。具体方法包括将洋葱内表皮染色后,制作成单层细胞的观察材料,以及先染色后脱色的方法,都能显著改善实验效果。