免疫扩散试验是一种用于检测抗原或抗体的方法。当检样孔无沉淀带，而两侧阳性孔的沉淀带在接近检样孔时变得模糊、消失，这可能是由于待检血清中抗体浓度过高导致沉淀带溶解所致。在这种情况下，可以对样品进行稀释后再进行检测。

免疫扩散试验的基本原理是利用抗原和抗体在凝胶介质中的扩散作用，在两者相遇时形成沉淀带。通过观察沉淀带的位置和形态，可以判断抗原或抗体是否存在以及它们之间的关系。

寒天粉

平皿

打孔器

生理盐水或其他缓冲液，可添加少量防腐剂如硫柳汞或叠氮钠。

1. 当检测抗原或比较抗原差异时，将抗血清置于中央孔，待测抗原或需比较的抗原置于周边孔。如果沉淀带完全融合，则表示为同一种抗原；部分连接则表明具有共同抗原决定簇；两条沉淀线相交则说明抗原完全不同。

2. 进行血清流行病学调查时，将标准抗原置于中央孔，周边孔依次加入标准阳性血清和待检血清。若待检孔与阳性孔的沉淀带完全融合，则判为阳性；无沉淀带或沉淀带与阳性对照完全交叉则判为阴性；若两阳性孔的沉淀带在接近待检孔时均向内弯曲，则判为弱阳性；只有一侧弯曲而另一侧仍为直线则判为可疑，需重新检测。

如果初次检测结果不确定，可以通过增加检样量来提高准确性。

测定抗血清效价时，将抗原置于中央孔，抗血清经倍比稀释后置于周边孔，最终形成的沉淀带对应的最高稀释倍数即为该抗血清的琼扩效价。