荧光检测
自然发光反应
荧光检测是一种快速而精确的化学分析方法,它能够检测人体细胞、细菌、霉菌以及食物残渣等物质。这种检测方法基于荧光素酶与ATP的反应,能够在短时间内获得反应结果。荧光检测的结果可以通过专用设备进行测量并数字化显示。这种方法最早应用于食品工业,随后在1985年扩展至化妆品制造领域。
特点
荧光检测具有多种显著的特点,包括:
- 荧光定量:采用国际主流的荧光定量PCR技术,迅速提升技术水平。
- 结果稳定:检测结果CV值与进口全自动PCR仪接近,具有自检功能,避免错误数据的输出。
- 封闭操作:全部检测过程均为闭管操作,于反应管处检测荧光,有效防止污染,解决PCR技术中最棘手之难题。
- 准确定量:满足临床对量化的需求,定量范围广,可涵盖大部分病原菌,自动曲线拟合。
- 灵敏度高:利用光谱信号灵敏性的优势,有效提高检测灵敏度。
- 安全:全程无毒检测。
- 操作简便:省去后处理的烦琐过程。
- 直接打印:直接打印结果,无需记录大量数据。
- 升级版:FS1000有与电脑连接的数据传输口,可以根据用户需求提供先进的分析软件,全面分析实验数据。电脑和打印机为选配附件。
- 故障率低:维护非常简单。
- 节约资源:可利用现有PCR扩增仪,最大限度节约资源。
缺陷
荧光检测的一个主要局限性在于并非所有化合物都能产生荧光。尽管许多分子本身并不发出荧光,但它们可能包含可用于合成荧光衍生物的官能团。例如,邻苯二甲醛是一种常用的荧光基团,常用于柱后衍生氨基酸。尽管荧光检测非常灵敏,但对于常规样品分析而言,通常不需要如此高的灵敏度。相比之下,ELSD的响应不受荧光基团的影响,因此不需要衍生步骤,从而显著缩短了样品预处理和分析时间。
应用
荧光检测广泛应用于各种科学和技术领域,包括但不限于:
- 流式荧光检测:适用于大规模样本统计,但无法提供空间定位信息,也无法进行荧光定位变化的实验。
- 荧光显微镜:能够进行空间观察和目标蛋白定位,但不适合大规模检测。
- 共聚焦荧光显微镜:具备良好的光学层切效果,能够获取三维定位信息,特别适合时间laps、FRAP和FRET等实验。
- 全内反射荧光显微镜:专用于膜研究,无法观测胞内信息。
- 双光子荧光显微镜:能够进行深层检测,如观察活体脑组织。
- 高内涵药筛系统:结合了流式和显微镜的功能,能够自动化完成实验,同时具备成像能力。
参考资料
荧光粉检测.豆丁网.2024-10-24
荧光检测器及检测方法.豆丁网.2024-10-24
目录
概述
特点
缺陷
应用
参考资料