约翰·威尔克斯·布斯（英语：John Wilkes Booth，1838年5月10日—1865年4月26日），美国男演员、刺杀林肯的刺客。

他同情南方的邦联，袒护奴隶制，对南北战争的结局甚为不满。1865年4月14日，他刺杀了林肯总统。在逃脱的过程中，被美国财政部卫队标志绊倒；跳到舞台上时，大叫：“这就是暴君的下场！”（拉丁语：Sic semper tyrannis，弗吉尼亚的格言）当时全场皆惊。之后他逃到一座贮存烟草的仓库躲藏，被包围仓库的士兵波士顿·科贝特开枪击毙。

约翰·威尔克斯·布斯出生于一个演艺世家，他的父亲朱尼厄斯·布鲁特斯·布斯及其未婚妻玛丽·安·福尔摩斯是著名的莎士比亚戏剧演员。1838年5月10日，布斯在马里兰州哈德福县贝莱尔附近的农场出生，家中十个孩子中排行第九。他的名字根据英国激进政治家约翰·威尔克斯命名。

布斯的童年在父亲的农场度过，他因精通马术和击剑而备受欢迎。他曾在贝莱尔学院、米尔顿男子寄宿学校和圣提摩太堂学习，但他并不是一个热衷于学习的学生。

布斯14岁时，父亲去世，他随后离开了学校。

1855年8月14日，17岁的布斯首次登台，在巴尔的摩查尔斯街剧院出演《理查三世》配角里士满伯爵。尽管初次登台时因忘词而受到嘘声，但布斯很快在戏剧界崭露头角。

1857年加入宾夕法尼亚州费城的拱街剧院，并在那里度过了整个季节。布斯在舞台上的表现充满激情，很快赢得了观众的喜爱。他的演技被一些评论家称赞为“天生的英才”，并以其英俊的外表和惊人的记忆力而闻名。

1850年代末，布斯已经成为一名成功的演员，年薪高达2万美元。

1860年代初，布斯开始了他的全国巡演，他的演出在纽约、波士顿、芝加哥等地受到热烈欢迎。

除了戏剧事业，布斯还投资了多个商业项目，包括炒卖波士顿后湾的土地和开发宾夕法尼亚州西北部的油井。他与合作伙伴一起在富兰克林的阿勒格尼河沿岸购买了土地，并在1863年后期开始钻探。1864年年初，他们的油井每天生产25万桶原油，收益颇丰。然而，由于油井被炸药炸坏，布斯在1864年11月撤出了石油业务。

布斯是一个坚定的南方支持者，他强烈反对废除美国奴隶制度。1859年12月，布斯亲眼目睹了废奴主义领袖约翰·布朗的绞刑，并对布朗的死感到满意。内战爆发后，布斯在战争期间继续在北方和南方的舞台上演出，并利用他的职务之便将奎宁走私到南方。布斯对亚伯拉罕·林肯的仇恨随着战争的进行而加深，他曾因在圣路易斯发表反政府言论而被捕，但最终被释放。

随着南部邦联的节节败退，布斯开始制定绑架林肯的计划。他组成了一支由南方支持者组成的松散队伍，计划将林肯绑架到离白宫3英里远的老兵之家，之后横渡波托马克河进入里士满。布斯还在蒙特利尔会见了邦联的几名间谍，但没有确凿证据表明邦联政府领导参与到布斯密谋绑架或暗杀的串谋。

1864年11月，林肯的连任使得布斯对总统满腔愤怒，他开始讨论绑架计划的资源和金钱问题。然而，随着联盟军在里士满被捕和李将军的投降，布斯的绑架计划已经不可行，他把目标改为暗杀。

1865年4月14日耶稣受难日，布斯得知亚伯拉罕·林肯将在福特剧院观看《我们的美国表弟》。他随即着手制定刺杀计划，并分别指派鲍威尔和艾特泽罗特刺杀国务卿威廉·H·苏厄德和副总统安德鲁·约翰逊。布斯似乎打算通过刺杀联邦政府的高层人物，把联邦政府斩首，并在恐慌和混乱的状态中把它推翻。然而，布斯是唯一一个成功的刺客：他在福特剧院的包厢内用0.44口径的德林加手枪朝林肯的后脑勺开枪，随后逃离现场。

布斯在逃亡过程中得到了多位同情者的帮助，包括塞缪尔·穆德医生和邦联间谍托马斯·琼斯。他在马里兰州南部的树林里躲藏，等待渡过波托马克河以进入弗吉尼亚的时机。然而，联邦军队在农村地区的丛林和沼泽搜索布斯逃跑后留下的痕迹，最终在弗吉尼亚州加罗林县的盖雷特农场找到了他。

4月26日黎明前，布斯在盖雷特的烟草仓库被联邦士兵发现。他拒绝投降，士兵于是放火烧谷仓。布斯在炽热的谷仓中走动时，波士顿·科贝特中士向其开枪。他颈部中枪，从谷仓爬到门廊，三个小时后在那里死去，终年26岁。

布斯的口袋装着一个指南针、一根蜡烛、五个女人的照片和他的日记本。他在日记中对亚伯拉罕·林肯死亡的描写是“他欠下了我们国家的所有烦恼，雅威只是让我用手段惩罚他。”

布斯的尸体被运到华盛顿哥伦比亚特区海军船坞作尸检，后来被转移到华盛顿阿森纳区的仓库中。1869年，尸体在归还给布斯的家属前被再次鉴定，家属们将布斯葬于巴尔的摩的祖坟绿山公墓。