空斑(lacuna)是指在特定条件下观察到的一种现象。当能产生大肠杆菌素的细菌与对此类大肠杆菌素敏感的指示菌一起接种于含有软琼脂的平板上并培养时,可以看到由单个细胞产生的大肠杆菌素对指示菌起到生长抑制作用而形成的圆形小斑块。这些空斑最初看起来类似细菌噬菌体形成的噬菌斑,但由于它们不具备传染性,因此被H. Ozeki(1959年)命名为空斑。。
空斑的形成是由于某个细胞受到病毒感染后,其繁殖出的病毒颗粒仅能扩散至邻近的细胞,从而导致周围细胞死亡或失去活力,最终在单层细胞上形成一个类似于噬菌斑的空缺区域。通过使用中性红等活性染料进行染色,能够更清楚地分辨活细胞和死细胞,同时增强空斑的可视性。
空斑技术常用于计算具有活性的动物病毒粒子数量。这一方法是在噬菌斑技术的基础上发展而来,由Dulbecco和Vogt(1953年)提出。他们发现,当在一薄层
琼脂覆盖的单层
细胞上进行实验时,如果某一个细胞被病毒感染,那么病毒会在此细胞内复制并扩散至相邻的细胞,最终形成一个空斑。这种方法不仅可用于区分活细胞和死细胞,还能使空斑更加明显。此外,当单层细胞受到肿瘤病毒感染时,会出现细胞急剧增多的现象,这种情况下的病变区域被称为病斑。