1999年于博参演电影《
男男女女》，自此开始演艺事业；2001年参演《
难忘时光》，饰演袁时光，《
夏日暖洋洋》，同年，主演的电影《丑角登场》入围第32届荷兰
鹿特丹国际电影节；2002年参演的电影《旧约》入围第53届
柏林国际电影节PANORAMA竞赛；2004年参演电影《蔓延》《
星星相吸惜》《
丑角登场》；2008年参演电影《
儿子》；2009年参演电影《
我如花似玉的儿子》；2011年参演电视剧《
水浒传》，饰演
董平；2014年出演电影《太平轮上》，饰演配给食物队长；2017年参演公安网络剧《南海·四大名捕》，饰演谌捕头/公孙策，同年还参演了《木板年画之三世情缘》；2018年，参加综艺《造就Talk》。
1999年，参演电影《
男男女女》，饰演男主角小博，当时他正在复习文化课，准备投考
北京电影学院表演学院。所幸的是，拍戏没有拖他的后腿儿。电影在瑞士洛迦国际电影节获得国际影评人大奖的时候，他也拿到了北京电影学院表演系的录取通知书。
2001年，参演电影《丑角登场》，饰演男主角小博。该片入围第3届韩国
全州国际电影节，第21届
温哥华国际电影节，第32届荷兰
鹿特丹国际电影节。
2004年，参演电影《
蔓延》，饰演男一号申明，该片第33届荷兰鹿特丹国际电影节。
2011年，在新版《水浒传》中，于博饰演
董平董平一角，将一个有情有义、英勇善战的双枪将演绎得精准到位，更是赋予了董平这一人物全新的精神内涵。
主要作品参演电影《
男男女女》 饰演：小博（男主角）《
旧约》 饰演：小博（男主角）《
丑角登场》 饰演：小博（男主角）《WC呼呼哈嘿》导演：
崔子恩《传冰》导演：
张晖林《
副歌》导演：崔子恩《蔓延》导演：
何建军《雾语》导演：崔子恩《
星星相吸惜》导演：崔子恩《千手观音》 饰演：路鹏
微电影《MASS》 饰演：小博（男主角）参演电视剧《难忘时光》 饰演：袁时光（男主角）
中国中央电视台电视剧制作中心《迷人的海》 饰演：于老师（男主角）《跟着阳光跳舞》 担任 导演助理《夜半歌声》 饰演 剧团演员新版《水浒》 饰演 双枪将董平《高山青》 饰演 白运喜话剧《教父/哈姆雷特》饰演：
意大利出租车司机。
于博在新版《
水浒传》中饰演
董平董平一角，将一个有情有义、英勇善战的双枪将演绎的精准到位，更是赋予了董平这一人物全新的精神内涵。