免疫亲和层析(IAFC)是一种利用抗原抗体特异性可逆结合特性进行样品净化的技术。它通过将抗体与惰性微珠共价结合后装柱,使抗原溶液经过免疫亲和柱,非目标化合物则沿柱流下,最终使用洗脱缓冲液洗脱出抗原,实现对目标化合物的纯化。这种技术具有很高的
提纯效率,通常仅需一次操作即可获得1000至10000倍的纯化效果。
免疫亲和层析(IAFC)最初于20世纪60年代末期由Axen等人提出,他们使用
溴化氰活化琼脂糖载体来固定抗体。此后,
Van等人在1987年首次成功地运用此技术净化了猪肉中的
氯霉素,并在1989年扩展到了
鸡蛋和牛奶中的氯霉素测定。目前,免疫亲和层析已广泛应用于医药、兽药、食品检测等领域,特别是在兽药残留检测方面,如猪肉中的磺胺类药物、
血浆中克仑特罗、血清中
二噁英等。此外,在生物样本中,如爱比菌素的应用,免疫亲和层析的回收率可达80%至86%。
免疫亲和层析(IAFC)作为一种高效的选择性净化技术,能够有效地解决传统样品净化技术中存在的问题,如多步操作、低选择性和易污染等。然而,由于其依赖于抗原抗体之间的特异性结合,对于一些复杂样品中的目标化合物可能无法完全捕获,这限制了其在某些情况下的适用性。