柱切换
柱切换
柱切换是一种在色谱分析过程中使用的常见技术。它涉及将两个或多个色谱柱与其他组件如检测器结合使用,以提高分析的准确性。这种技术的主要目的是防止杂质成分对色谱柱造成污染以及对分析精度和灵敏度的影响。
应用场景
柱切换技术通常用于高效液相色谱(HPLC)或气相色谱(GC)分析体内毒物时,当遇到难以分离或未充分分离的组分与内源性杂质时。在这种情况下,直接将样品注入色谱柱可能导致杂质不可逆地吸附在柱上,从而导致柱堵塞。因此,柱切换技术被用来先通过预处理柱(也称为富集柱)处理样品,使得待测组分得以进一步浓缩和纯化,而杂质则留在预柱上。随后,待测组分再进入分析柱进行分离分析。在HPLC中,柱切换通常是通过阀件来实现的,而在GC中,则可以使用压力管柱切换来进行分析。常见的柱切换系统包括单柱正反冲洗、双柱并联切换和双柱串联切换等多种排列方式。
实例
建立了一种快速检测大鼠血浆中普萘洛尔对映体浓度的方法,利用柱切换-高效液相色谱法。这种方法采用了自制的限制进样填料柱作为预处理柱,通过直接进样的方式,使普萘洛尔对映体在预处理柱上保留,同时去除血浆中的蛋白质等大分子物质。然后,通过柱切换技术,使普萘洛尔对映体在键合型纤维素三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)(Chiralcel OD-RH)分析柱上得到手性拆分。通过对实验条件的优化,确定了切换前预处理流动相为硼酸盐缓冲液(pH 8.5)-甲醇(95:5,v/v),流速为1.0 mL/min;切换后分析流动相为2-丙醇乙醇0.2 mmol/L硼酸盐缓冲液(pH 8.5)(30:30:40,v/v/v),流速为0.8 mL/min;切换时间为3分钟;柱温为25°C;检测波长为293 nm。普萘洛尔两对映体在25~500 mg/L的质量浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.9995),三个加标水平(50、100、250 mg/L)的平均回收率分别为97.89%~101.56%,日内和日间的精密度均小于5%。该方法简单、快速、灵敏、准确,适用于血浆样本中手性药物的药代动力学研究。
目录
概述
应用场景
实例
参考资料