病理切片是将受检查病变器官、组织用切片机制成的供显微镜检查用的薄片。制作方法是经过快速冰冻、各种化学药品和埋藏法处理，使组织固定硬化，用切片机切成几微米厚的薄片，黏附在玻片上，再染以各种颜色，可为临床诊断、治疗提供组织学依据。

病理切片是形态学检查的常用方法，在临床外科病理诊断，尤其是诊断肿瘤性质时常采用病理切片检查，对疾病的诊断有重要价值。随着医疗事业的发展，病理切片的结果对肿瘤治疗提供重要的理论依据。因此，病理切片的制作完整性显得尤为重要。

已固定好病料，石蜡，手术刀，手术剪，镊子，脱水框，染色缸，梯度脱水酒精和透明剂一套，烘箱，切片机，毛笔，玻片，蛋白丙三醇，染色架，酒精灯，三角架，大烧杯，温度计，火柴，切片刀，荧光笔或铅笔。

采取的病理材料必须立即放入10％甲醛水溶液固定液中。

组织经固定后，尚含有多量水分，而水与透明剂苯、石蜡根本不相融合。必须先把组织中的水分除去。但脱水剂必须是与水在任何比率下均能混合的液体，脱水剂常兼有硬化组织的作用。最常用的脱水剂为乙醇、丙酮等。

1．酒精沸点78．4℃，为最常用的脱水剂。脱水能力强，并能使组织硬化，能较好地与二甲苯透明剂相混合。最终结果表明，只要脱水环节处理好，都会得到好的切片。脱水的程序为70％一80％一95％一100％。各级酒精2—4小时，视材料的大小、厚薄而定。100％酒精有硬化组织的作用，时间不宜太长，一般不超过3小时。脑组织、脂肪组织或疏松结缔组织，脱水时间要适当延长。

2．丙沸点为56℃。脱水作用比乙醇强，但对组织块的收缩较大，主要用于快速脱水或固定兼脱水。脱水时间l一3小时左右。

透明对组织有脱酒精及透明两种作用。当组织中全部为透明剂占有时，光线可以透过，组织可呈现不同程度的透明状态，此种现象称为透明，具有这种作用的试剂称为透明剂。常用的透明剂有：

1．二甲苯是最常用的良好透明剂，不影响各种染色。二甲苯易溶于酒精，能溶解石蜡，也是封固剂，不吸收水，透明能力强，易使组织收缩、变脆，故组织块在二甲苯中不宜久留，特别对小动物组织材料必须严格控制好(各种器官的透明差异很大)，通常为半小时到1小时左右。

当二甲苯透明时必须持组织放在专用二甲苯皿器中，这样可减少透明时间，有利于组织透明彻底，在换组织块透明时候，所用的镊子等器具必须干燥，不得将水滴混入二甲苯中，因水滴易被组织吸收而影响透明程度，潮湿天气更应引起注意。

2．邻羟基苯甲酸甲酯（水杨酸甲）为无色油样液体，易溶于醇、醚及乙酸，难溶于水。透明速度较慢，数小时或数天。一般经乙醇脱水后再入冬梓油。

组织经脱水透明后要用石蜡等支持剂透入内部，并除去组织中的透明剂，把软组织变为适当硬度的蜡块，以便切成切片。

浸蜡的要点有二：①石蜡要完全渗入细胞的每个部分：②石蜡要紧密而均匀的贴在细胞内外两面，使组织与石蜡成为不可分离的状态。

为了减少组织的收缩和提高浸蜡的效果，浸蜡用的石蜡依据熔点不同，先经低熔点石蜡再经高熔点石蜡。一般设置熔点50—52℃为第一缸蜡，52—54℃为第二缸蜡；54—56℃为第三缸蜡，第三缸石蜡的熔点根据季节可进行调节，夏天使用熔点56—58℃或58—60℃石蜡，盛夏使用熔点60—62℃石蜡。

浸蜡的时间根据不同组织类型及其大小而定：组织1—2cm大小，浸蜡2—3小时，2—3cm浸蜡3—5小时，对细胞密集，纤维成分少，如肝、肾应减少时间，含脂肪和纤维成分较多的组织需增加时间。

浸蜡时石蜡在温箱内的温度应与石蜡的熔点相配合，温度不可过高过低，过高会使组织高度收缩变脆，无法切片，过低石蜡将凝固达不到浸蜡的作用。常规的作法是调节至略高于石蜡熔点2—3℃。控制温度是浸蜡极其重要的关键。

将液态的石蜡倒入金属包埋框或包埋的纸盒中，再将浸好蜡的组织块平放底部，注意切面方向朝下放置，待石蜡凝固后去掉包埋框，完全冷却变硬后再修整蜡块，要求组织外围的石蜡保留适中以便切片。

1．修整蜡块，石蜡切片是以石蜡作为组织的支持媒介。应先将包埋的每块组织周围过多的石蜡切去，四周留约2mm的石蜡边。留得过少，使连续切片分片困难且易破坏组织；留得过多，徒占地方，同时使标本之间的距离过远而镜检不便。蜡块两边必须切成平行的直线，否则切下的蜡条弯曲，也不可修成圆角，致蜡带容易分开不能成条。

2．玻片处理一般玻片用76X26mm载片，厚度l一1．5mm，厚于1．5mm的玻片不宜用于高倍镜及油镜的观察，选购玻片应注意：从侧面看白色的为优品，带蓝或绿色的为劣品，平面光滑不带波纹者为上品，稍有波纹者为次品，边缘光滑己加工磨边者为上品，边缘粗糙未经磨边者为次品。载玻片上面如有云雾斑点，系受霉菌侵蚀不能使用。

新的玻片也必须擦洗干净，否则染色时引起切片脱落，方法有①煮沸洗涤法、②洗液浸泡法。最后经95％乙醇浸泡脱脂、烘干。

将洗净的载玻片上均匀涂抹薄薄的一层蛋白丙三醇(防止组织脱片)，放置冰箱备用。

1．将预冷的蜡块固定在石蜡切片机上，使蜡块的切面与刀口成平行方向，刀的倾斜度通常为15℃，转动轮转推进器，调节切片厚度为6μm，切成厚度均匀的切片。

2．左手持毛笔，右手旋动切片机转把，切片带出来之后，用毛笔轻轻托起，再用眼科镊轻镊蜡片，以正面放入展片箱中，其水温40—43℃左右。待摊平整后捞片。

3．贴附切片左手持载玻片之一端，垂直入水去附贴切片，右手用毛笔辅助推动，附贴至玻片上的三分之二处。

4．切片贴附后，放在空气中稍晾干，即可进行烤片。血块组织、皮肤组织须及时烤片。但对脑组织、脂肪组织待完全晾干后才能进行，这样可防止产生气泡而影响染色。烤片的温度以蜡溶解为准。也可以放置60℃烘箱内烘焙过夜。

1．固定组织所用的固定液要充足，至少相当于标本总体积的5倍以上，标本容器及其口径有适当大小，使标本能原形进行固定，避免使标本遭受挤压。

2．组织块透明在制片中是很重要的环节，如果组织不能透明，其原因可能有脱水未尽、组织太厚、透明时间不够以及与某些组织本身性质有关等。所以应从多方面考虑，尽可能使组织达到透明目的。通常根据透明时间与眼观相结合判断透明程度。

3．凡是陈旧、腐败或干枯的组织不易制成好切片。

4．固定失时或固定不当的组织，染色时常出现核染色质着色浅、轮廓不清，出现程度不等的片状发白区。

5．组织脱水、透明和浸蜡过度，会造成组织过硬过脆，特别是小动物组织应严格控制。

6．切片刀不锋利，切片时会自行卷起或皱起，不能顺利连成长蜡带。切片刀有缺口，易造成切片断裂、破碎、不完整及刀痕等现象，不利于切片和观察。

7．组织切片机各个零件和螺丝应旋紧，切片刀应固定牢固，否则将会产生震动，以致出现切片厚薄不匀和横皱纹等现象。

整个制作环节参考资料为：

病理切片机是重要医疗精密仪器之一。主要用于病理、科研、教学及其他生物切片用。切片机由刀座、刀片、标本槽、调节部件及操作部件等组成。可根据需要调节切片厚度，间隔厚度及切片面积。操作时应按规程，并在所限定范围内；使用完毕及时清擦，对运动摩擦而保持润滑；停用时用机罩盖好，避免灰尘。

将病理切片，经显微镜观察后所作的记录。可供检查病理变化,研究其发生、发展。为临床诊断、治疗提供依据。是患者病历的组成部分。

病理切片在临床医疗中每天都会进行，其应用广泛且对诊断疾病有重要价值。病理切片制作需减少对切片的损害，提高疾病的诊断效果。影响病理切片损害的主要因素主要是以下这些原因。

在样本切割取样时可能会破坏组织的完整性或送检时间间隔长，运输途中剧烈的振荡使组织破坏等。

这一步是最重要的影响因素，大部分的病理切片损害是该过程中被破坏，如包埋切片、标本固定、染色封固中，由于技术人员的不正确操作或失误影响切片完整性。

不同的实验环境、操作人员的技术水平以及仪器、器皿、试剂的差异等，均直接或间接的影响病理标本的完整性。

针对病理切片常见影响因素的处理方法通过对各影响因素的分析，我们初步制定相应的处理方法。

手术取样时注意组织的完整性，用统一的无菌器皿装取标本，尽快送检并避免剧烈振荡。

包埋切片、标本固定、染色封固等由专业熟练的技术人员进行，规范切片制作的标准。

每天进行消毒和检测，将温度、湿度及空气设置到指定标准。

对病理检查的相关知识和技术操作进行统一规范。

使用相同的病理切片室、配套实验试剂、使用标准的仪器、设备等，实验前检查仪器和试剂的完整性、有效性，降低外部因素的影响。

综上所述，病理切片检查是常见的形态学检测方法，对诊断患者病情有重要意义，为减少影响病理切片的损害，需做到外部因素降低的同时规范操作流程，保证病理切片的完整性，并提高临床诊断的效率。

数字病理切片 (digitalslideofpathology)又称虚拟病理切片(virtualslideofpathology)，是一种现代数字电路与传统光学放大装置有机结合的技术。它将传统的玻璃病理切片通过全自动显微镜或光学放大系统扫描采集得到高分辨数字图像，再应用计算机对得到的图像自动进行高精度多视野无缝隙拼接和处理，获得优质的可视化数据以应用于病理学的各个领域。