子囊菌门 Phylum (Ascomycota)
盘菌亚门(Pezizomycotina)
粪壳菌纲(Sordariomycetes)肉座菌亚纲(Hypocreomycetidae)
肉座菌目(Hypocreales)
麦角菌科(Clavicipitaceae)中的一属。重要种如
冬虫夏草图,夏秋季,其子囊孢子萌发成菌丝体,侵入并
寄生于
尺蠖等
鳞翅目幼虫体上,把虫体变成充满菌丝的菌核。翌年夏季,菌核上生出一个有柄的棍棒形子座,顶端膨大部分褐色,近圆柱形,其边缘可形成许多
子囊壳。子囊孢子仅2个如线形、多胞。
冬虫夏草是我国特产,始载于
乾隆三十年成书的《
本草纲目拾遗》,可作补药,有益肺、肾和具止血化痰等功能,主治虚劳、咳嗽、痰血、气喘、腰痛、
遗精等症。其中含7%左右的虫草酸。目前已可用深层液体培养法获得含有药效成分的菌丝体。分布于
四川省、
青海省、
西藏自治区、
甘肃省和
云南省等地的高海拔山区。因过度采挖,目前自然资源已临濒危,亟待保护。
形态特征
虫草属(Cordyceps)虫草属真菌
寄生于昆虫,把虫体变成充满
菌丝的
僵蚕,从僵虫前端生出有柄头状或棍棒状的子座。
本属最常见的是
冬虫夏草图(Cordyceps sinesis),它寄生在
鳞翅目昆虫的
美国白灯蛾上,被害的昆虫(如
尺蠖)冬天钻入土内,夏天虫草菌从被害虫体生出一有柄的子座(即所谓的草)。子座单个,罕见2 ~ 3个,长4 ~ 11cm,基部粗1.5 ~ 4mm,向上渐细,头部不膨大或膨大成圆柱形,褐色,初期内部充实,后变中空。
子囊壳椭圆形至卵形,生在子座近表面,基部稍陷于子座内。子囊产生在子囊壳内,细长。每个子囊内含有2个具隔膜的
子囊孢子,子囊孢子透明,线状。
命名争论
从天然
冬虫夏草图分离的菌种已有很多报道,刘杰麟(1990)在总结冬虫夏草的无性型问题时提到了 10个名称;梁佩琼和
陆大京(1990)指出用于深层发酵制成药品或保健品的无性型菌株有 4 个,随后梁佩琼(1991)又列举了冬虫夏草 14 个菌株;
林树钱和余美兰(1997)对涉及冬虫夏草无性型菌种的 9 个名称进行了评述;王伟等(1998)编写了从冬虫夏草分离的 13 个无性型的检索表;李增智等(2000)在用分子生物学方法证明
冬虫夏草图无性型问题的文章中简单讨论了有关的 8 个名称;
梁宗琦(2001)总结了分离自冬虫夏草的无性型及其相关的菌物达 10 个属 11 个种,并用表格列出 9 个属 10 个名称。
刘作易等(Liuet al.,2001)提到有关的 7 个名称。面对如此众多的菌种和名称,就什么是冬虫夏草的正确无性型问题一直颇有争议。这种混乱状况,对相关的药品和保健品生产应用造成了一定困难。
品种
1.合格发表的新种名称
Chrysosporium sinense(
中原地区金孢霉)
Mortierella hepiali(
蝙蝠蛾科被孢霉)
Paecilomyces sinensis(中国拟
青霉)
Scytalidium hepiali(蝙蝠蛾柱霉)Tolypocladium sinense(中国弯颈霉)
2 不合格发表或应作为异名的名称
Cephalosporium dongchongxiacae(
冬虫夏草图头孢)
Cephalosporium sinensis(虫草头孢)
Hirsutella hepiali(蝙蝠蛾被毛孢)
Paecilomyces hepiali(蝙蝠蛾拟青霉)
Paecilomyces lingi(西藏林芝拟青霉)
Synnematium sinense(中华束丝孢)
Verticillium
中华缺翅虫(中国轮枝孢)
已作为异名处理的名称有:Cephalosporium acremoneum(顶头孢,=Acremonium strictum)Isaria farinosa(虫花棒束孢,=Paecilomyces farinosus)为了避免在名称上的混乱,在研究
冬虫夏草图的无性型时不应继续使用这些名称。
3 不可能是冬虫夏草无性型的名称Mortierella hepiali(
蝙蝠蛾科被孢霉,为
接合菌门的名称,不可能是
子囊菌门的无性型)Paecilomyces
中华缺翅虫(中国拟
青霉,已为分子证据所排除)Sporothrix insectorum(虫生簇孢,已为分子证据所排除)
4 可能不是冬虫夏草无性型的名称Chrysosporium sinense(中国金孢霉,与冬虫夏草的 RAPD 图谱的相似性低)Metarhizium anisopliae(
绿僵菌,广布种,多寄主)
5 与
冬虫夏草图的关系有待验证的名称Acremonium strictum(直立顶孢)=Cephalosporium acremoneum(顶头孢)Isaria sp.(棒束孢属未定名种)Paecilomyces farinosus(粉拟
青霉)=Isaria farinosa(虫花棒束孢)Paecilomyces hepiali(蝙蝠蛾拟青霉)Scydalium sp.(柱霉属未定名种,=?Scytalidium sp.)Scytalidium hepiali(
蝙蝠蛾科柱霉)Stachybotrys sp.(葡萄穗霉属未定名种)Tolypocladium sinense(中国弯颈霉)Verticillium
中华缺翅虫(中国轮枝孢)Verticillium sp.(轮枝孢属未定名种)
Hirsutella sinensis(
中原地区被毛孢)
Cephalosporium dongchongxiacae(冬虫夏草头孢)
Cephalosporium sinensis(虫草头孢)
Cephalosporium sp.(
蝙蝠蛾科被毛孢)
Synnematium sinense(中华束丝孢)
生长条件
碳源
碳源是
北虫草合成
糖类和氨基酸的基础,也是重要的能量来源。人工栽培时,蛹虫草可利用的碳源有葡萄糖、
蔗糖、
麦芽糖、淀粉、
果胶等,其中尤以葡萄糖、蔗糖等小分子糖类的利用效果最好。
氮源
氮是蛹虫草自身合成的
蛋白质、
核酸等有机氮以及
铵盐等无机氮。能利用的有机氮很多,如氨基酸、
蛋白胨、
豆饼粉、蚕蛹粉等;无机氮主要有
氯化铵、
硝酸钠、
磷酸氢二铵等。有机氮的利用效果最好。
矿质元素
以磷、钾、钙、镁等为主要元素。一般通过添加
无机盐类来满足
北虫草对矿质元素的需求。
维生素
虫草菌丝不能合成必要的维生素,适当加入VB1有利于菌丝的生长发育。
培养
温度
在虫草的不同生长发育阶段都有最适温度、最低温度和最高温度的界限。菌丝生长温度6℃—30℃,低于6℃极少生长,高于30℃停止生长,甚至死亡。最适生长温度为18℃—22℃;子实体生长温度为10℃—25℃,最适生产温度为20℃—23℃。原基分化时需较大温差刺激,一般应保持5℃—10℃温差。
水分和湿度水分
菌丝生长阶段,培养基含水量保持在60%—65%,空气相对湿度保持在60%—70%;子实体生长阶段,培养基含水量要达到65%—70%,空气相对湿度保持在80%—90%。要注意培养基适时补水和补充营养液。
空气
北虫草需要少量空气。但在子实体发生期要适当通风,增加新鲜空气。否则,
二氧化碳积累过多,子座不能正常分化,影响生长发育。
光照
孢子萌发和菌丝生长阶段不需要光照,应保持黑暗环境。但转化到生殖生长阶段需要明亮的散射光,光照度为100—240勒(勒为光照度单位)。光照强,菌丝色泽深,质量好,产量高。
酸碱度
蛹虫草为偏酸性真菌,其菌丝生长发育最适pH为5.2—6.8。但在灭菌和培养过程中pH值要下降。所以在配制培养基时,应调高pH值1—1.5,在配制培养基时可加0.1%—0.2%的
磷酸氢二钾或磷酸氢二钾等缓冲物质。
培养基配制
以大米、玉米等作主料,另添加10%-25%的蚕蛹粉或奶粉妈提高
北虫草子实体的品质。将培养料与营养液以1:1比例拌匀,pH值掌握在5.5-7.0。按常规装瓶、灭菌、接种。
菌丝体培养
接种后的料瓶,应置于清洁、避光的环境中培养,保护空气湿度60%。初始阶段,为减少
杂菌污染,室内温室宜保持在15℃-18℃之间,待料面布满虫草菌丝后,将温度提到20℃-23℃,持续15d左右,菌丝即可吃透培养料,完成营养生长。
子实体培养
菌丝体成熟后,由白色逐渐转为桔黄色,此时,室内应增加光照白,白天利用自然散射光,保持200
勒克斯,晚间可利用日光灯作光源,每天应不少于10h光照,以促使菌丝体转色和刺激原基形成。待料面突起,并形成小米粒状原基时,要适当通风,补充新鲜空气,保护室内温度18℃-22℃,并提高空气相对温度至80%-85%。如湿度太大,易使培养基提早失水而影响产量。
北虫草有较强的趋光性,因此在子实体形成后,应根据情况适当调整培养瓶与光源的相对方向,或调整室内光源方向,以保证子实体的正常生长形态,从而提高产量。待子实体不再生长,其顶端出现许多小刺时,表明已成熟。采收时,用无菌镊子钳出子实体,然后再加少许营养液,重新包扎好瓶口,继续培养,20d左右,又可长出第二批子座。采收下的子实体晾干或低温烘干后出售。暂不出售,应密封好置低温干燥处贮存。