运载体(
向量),也称为载体或
基因工程载体,是指可携带外来
遗传物质进入另一
细胞的媒介
脱氧核糖核酸或
核糖核酸分子,且能在受体细胞内复制和/或表现。含有外源DNA的载体称为重组DNA。运载体的主要作用是作为
运载工具,将目的基因转移到受体细胞中,并在受体细胞内对目的基因进行大量的复制(称为
克隆),最终表达大量目的
基因产物,经分离纯化被人们利用。
运载体主要分为四种类型:
质粒、
病毒载体(例如λ
噬菌体)、黏
质体和人工
染色体。其中,最常用的运载体是质粒。质粒是一种相对分子质量较小、独立于
拟核区DNA之外的环状DNA(一般有1~200kb左右,kb为千
核苷酸碱基对),有的一个细菌中有一个,有的一个细菌中有多个。质粒能通过细菌间的接合由一个细菌向另一个细菌转移,可以独立复制,也可整合到细菌拟核
脱氧核糖核酸中,随着拟核DNA的复制而复制。除了质粒,噬菌体或某些病毒也是常用的运载体。除以上类型外,人们还在不断寻找新的运载体,如
叶绿体或
线粒体DNA等也有可能成为运载体。所有遗传工程化的载体,共同点是具有复制起点,
多克隆位点和可选择的标记。
②有一个至多个限制酶
切点,而且每种酶切位点最好只有一个,如
大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点,可适于多种限制酶切割的
脱氧核糖核酸插入;
③有一定的标记基因,便于进行筛选。如大肠杆菌的pBR322
质粒携带氨青霉素抗性基因和
四环素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因;
将运载体插入靶
细胞的过程通常称为转化(Transformation)对于细菌细胞,或
转染(Transfection)对于
真核生物,尽管
病毒载体的插入通常称为
转导(Transduction)。这些方法是
基因工程中常用的技术手段,用于将外源基因导入
宿主细胞,以便进行进一步的研究或应用。