过碘酸希夫反应(英文名:periodic acid Schiff reaction),简称PAS或PAS反应,又称糖原染色,是显示糖原的细胞化学方法,该反应适用于细胞和组织中的多糖、黏多糖、
黏蛋白等的显示。
过
碘酸希夫反应的化学原理为:
糖原中的1,2-
乙二醇基经过碘酸氧化而产生双
醛基。醛与希夫
染料中的无色
品红作用,使无色的
亚硫酸品红失去亚硫酸,重新排列,恢复品红对结构,显示紫红色,定位于胞质中糖原所在部位。
在临床方面,过碘酸希夫反应可用于鉴别红血病、红白血病及贫血类型,
急性白血病细胞类型及其他细胞类型。此外,过碘酸希夫反应还可应用于
糖尿病的诊断及研究和某些肿瘤的诊断及鉴别等方面。
高碘酸希夫反应(periodic acid Schiff reaction,PAS)是显示多糖、
黏多糖、糖蛋白的组织化学反应,糖被
强氧化剂过碘酸氧化后,形成多醛,后者再与无色的
品红硫醛
配位化合物(即
希夫试剂)反应,形成的终产物为紫红色沉淀。
高碘酸希夫反应又称糖原染色。
糖原中的1,2-
乙二醇基经过
碘酸氧化而产生双
醛基。醛与希夫
染料中的无色
品红作用,使无色的
亚硫酸品红失去亚硫酸,重新排列,恢复品红对醌结构,显示紫红色,定位于胞质中
糖原所在部位。
4、用
亚硫酸溶液冲洗3次(此步亦可省略),再用流水冲洗2~3min,待干。
7、结果判断:
细胞胞质中出现红色弥散状、颗粒状或块状物质为阳性。胞质无红色或无红色颗粒为阴性,如下图所示。
糖原染色主要应用于:(1)
糖尿病的诊断及研究;(2)某些肿瘤的诊断及鉴别,如
卵巢无性细胞瘤、
睾丸精原细胞瘤、骨
尤文肉瘤等;(3)糖原贮积症的诊断及研究;(4)心机病变及其他
心血管疾病的诊断及研究;(5)证明与区分细胞内空泡
变性等。
红血病、红白血病的幼红细胞呈强阳性反应,积分明显增高;
缺铁性贫血(irondeficiencyanemia,IDA)、重型海洋性贫血及
骨髓增生异常综合征(myelodysplasticsyndromeMD)时,PAS积分亦可增高:
溶血性贫血(hemolyticanemia,HA)、
淋巴瘤的幼红细胞呈
阴性反应或弱阳性反应;
再生不良性贫血(
妊娠合并再生障碍性贫血,AA)、
巨幼细胞性贫血(megaloblasticanemia,MA)时幼红细胞呈阴性反应。PAS染色对于红细胞系统疾病的诊断和鉴别诊断有一定价值。但恶性增生的红细胞并不都呈阳性反应,而良性增生的红
细胞也并不都呈阴性反应,因此诊断时应结合其他临床资料综合分析。
PAS染色可用于辅助鉴别急性白血病的细胞类型:①
急性淋巴性白血病原始、幼稚淋巴细胞PAS染色呈阴性或阳性反应,阳性反应物多为红色粗颗粒状或块状,围绕核周呈
环形排列,胞质底色一般无红色;②急性粒细胞白血病原始粒细胞呈
阴性反应或胞质呈淡红色弥漫分布;③
急性单核细胞白血病原始和幼稚单核细胞呈阴性或阳性反应,存在弥漫分布的红色细颗粒,胞质边缘及
伪足处颗粒较粗大,可见红色小珠或裙边样反应;M4E0异常
嗜酸性粒细胞PAS染色可见深粉红色小珠;④急性髓细胞
白血病M。型PAS染色呈阳性反应,表现为细颗粒、中粗颗粒散在分布,有时可见红色小珠;红白血病的有核红细胞PAS染色多呈阳性反应,且阳性率高,成熟红细胞可呈阳性反应,其他类型急、
慢性白血病的有核红
细胞PAS染色多呈
阴性反应;巨核细胞白血病原始巨核细胞PAS染色呈颗粒状阳性,部分细胞可见小珠状或块状,小巨核细胞PAS染色可见弥散状分布的细小红色颗粒,边缘处为粗颗粒及小珠;嗜碱性粒细胞白血病的嗜碱性粒细胞PAS染色呈强阳性反应,呈粗颗粒、珠状、块状,有时可与幼稚
淋巴细胞PAS染色的阳性反应类似,应注意鉴别;浆细胞PAS染色呈弱阳性反应,可见淡粉红色细小颗粒,极少数可见粗颗粒和小珠;Auer小体PAS染色呈阳性反应。
PAS染色可用于其他类型细胞的鉴别:①戈谢细胞和尼曼-匹克细胞:戈谢细胞PAS染色呈强阳性反应;尼曼-匹克
细胞呈阴性或弱阳性反应,空泡中心呈阴性。②
非霍奇金淋巴瘤细胞呈阳性反应,可见粗颗粒散在分布;Reed-Sternberg细胞PAS染色则呈弱阳性或
阴性反应。③
骨髓转移的腺癌细胞呈强阳性反应,可见红色颗粒或块状,肥大细胞呈强阳性反应,红色细颗粒弥散分布,部分细胞可见大而粗的红色颗粒。