马休是马腾次子，马超之弟。在李郭之乱中和弟弟马铁据守一方，随马腾进入邺城遗址之后受封为奉车都尉，掌管皇帝的车马。

他的父亲马腾遭韩遂进攻时，他随父亲马腾入京受职，被封为奉车都尉，随后他们一家在邺城居住。然而，因兄长马超起兵反抗曹操，他受到牵连，于公元212年被曹操杀害。祖父马肃曾任天水郡兰干县尉；父亲马腾是东汉末年军阀，后因马超起兵反曹被杀；兄长马超是汉末军阀之一，蜀汉骠骑将军，斄乡侯，武威郡牧；三弟马铁被召进京为骑都尉，后因马超起兵反曹被杀；堂兄马岱一直跟随马超，位至平北将军，陈仓侯。

公元208年（建安十三年），马腾入朝为官，被曹操任命为卫尉。马休被封为奉车都尉。

公元211年（建安十六年），曹操因马超拥兵据守陇上，起兵攻之，败超，次年（212）诛杀马腾，夷灭三族，马休同时遇害。

郝经：“马腾父子勇冠西州，与韩遂颉为寇，残灭三辅，垦伤汉室。

《三国演义》：“父子齐芳烈，忠贞著一门，捐生图国难，誓死答君恩。嚼血盟言在，诛奸义存。西凉推世胄，不愧伏波孙！

祖父：马平，曾任天水郡兰干县尉。

父亲：马腾，后因马超起兵反曹被杀。

大哥：马超，汉末军阀之一，蜀汉骠骑将军，斄乡侯，凉州牧。

三弟：马铁，被召进京为骑都尉，后因马超起兵反曹被杀。

堂兄：马岱，一直跟随马超，位至平北将军，陈仓侯。

四妹：马云騄，[《反三国演义》中的虚构人物]

马腾次子。随父马腾进京，密谋征讨曹操。后来后来划泄漏，被曹军包围，兵败被擒，与马腾一起遇害。

1994年电视剧《三国演义》梁志文饰演马休。

由于苗泽告密曹操马腾造反，和父亲一样被曹操下令斩首，马腾死后，苗泽和李春香被曹操斩首。