田小洁出身曲艺世家。1995年田小洁主演电影《梅雨季节》，讲述了田小洁主演的陶石与宋盈盈的师生恋情。29岁时他在经历了下岗浪潮后考入中央戏剧学院，大一时接演了第一部电视剧《激情燃烧的岁月》，在剧中饰演谢枫并凭此剧崭露头角。2003年他参演革命历史题材电视剧《走向共和》，饰演辜鸿铭。2009年田小洁出演军旅剧《战地浪漫曲》毕中原一角，该剧叙事风格轻松、幽默。

2010年《黎明之前》播出，该剧获得了第17届白玉兰最佳电视剧金奖，田小洁凭借剧中反派李伯涵一角给观众留下深刻印象并迎来了事业的一个小高峰。同年6月，他饰演了电视剧《我是业主》李大辉一角，一个因买房而逐步陷入困境的佟南方男人。2014年，他凭借微电影《代驾》中邓城一角获得第四届北京大学电影节荣获剧情单元社会组“最佳男演员”奖。次年，他凭借电影《有的人》获第4届北京电影学院导演系颁发的“导演系特别荣誉奖”。2016年田小洁参演播出的《到窑湾之龙鼎风云》讲述了一段寻宝、夺宝、护宝的故事，他饰演了反派何望龙。田小洁在2022年热播剧《重生之门》中饰演了人狠话不多的反派人物丁生火， 不少网友包括其本人都在社交平台发“丁老六”的表情包，他也因此成功出圈。2024年4月27日，田小洁参演的电视剧《微暗之火》播出。12月29日，田小洁参演的电视剧《蔷薇风暴》播出。

田小洁出身曲艺世家，父母都在江西省赣剧院从事文艺工作。

受环境影响，田小洁最初想报考省内的艺术院校，但以失败告终。这之后，他当过文艺兵，在汽车修理厂当过工人。28岁那年，工厂减员，田小洁成了下岗的第一批职工，之后他找到了一份司机的工作，但他一直认为这不是自己想要的生活。到了29岁，他看到中央戏剧学院老师关颖开的表演班的招生简章，经过四个月的培训后报考中戏，他在经过层层筛选后通过了考试。

2001年，大学一年级时的田小洁接演的首部电视剧作品《激情燃烧的岁月》播出，他在剧中饰演褚琴（吕丽萍饰）的初恋男友谢枫，一个忧郁内敛的文艺青年，并凭借这部作品在行业内崭露头角。2003年，他出演了张国庆执导的反黑题材剧《公安局长》，饰演冷严。同年，他参演了张黎执导的中国近代史电视剧《走向共和》，饰演辜鸿铭，该剧集中描摹了中国共产党成立前80年的中国历史，豆瓣评分9.6。2004年，他与柳云龙、张嘉益等人合作出演公安题材悬疑剧《变脸》，饰演贾超西。2008年，他主演军旅题材电视剧《穿越烽火线》贾旺财一角，该剧以八路军战士保育院孩子们安全转移为切入点，表达主旨“保护孩子，决不允许孩子拿起武器”。

2009年6月，他在都市情感生活剧《我是业主》中饰演李大辉，剧中作为“一房二卖”受害人一开始与方东旭为了一套房子争的你死我活，但经物业经理调和后一起站在业主角度团结起来，与陈自强对立，最后父爱将这两个业主和物业陈自强三人团结到了一起。同年，田小洁与林永健合作出演军旅题材电视剧《战地浪漫曲》，饰演政治部副主任毕中原，该剧叙事风格轻松、幽默，12月9号登陆四川省、江苏省、重庆、天津四大卫视后形成了激烈竞争，获得成功。

2010年，田小洁出演的电视剧《黎明之前》播出，他饰演的大反派国民党陆军上校情报官李伯涵气质独特，集沉稳果断和老谋深算于一身，给观众留下深刻的印象，这也让他迎来了事业的一个小高峰，该剧讲述了1948年国共两党抗争进入白热化阶段时一名中共地下党员落网叛变后发生的一系列故事，获得了第17届白玉兰最佳电视剧金奖。12月，国内电视人盛会《安徽卫视国剧盛典》晚会活动环节，田小洁首次演唱歌曲《太阳最红，毛主席最亲》。2013年田小洁主演了民族工商业体裁《到窑湾之龙鼎风云》，饰演一个一心梦想复辟帝制的反派何望龙，在剧中与外国文物贩子、护国讨袁的爱国人士一起演绎出了一出寻宝、夺宝、护宝的戏码。4月，电视剧《乱世三义》播出，该剧充分尊重历史，依托史实再现了清末日俄战争、反清共和战争等战争，田小洁在剧中扮演了智慧、偏执、虐心的索智义，在拍摄中从最初一百多场戏增加到五百多场，展现了演技，获得大量关注。

田小洁在2014年8月1日播出的电视剧《你在微笑我却哭了》中饰演了为了妹妹付出一切，让人倍感心酸的贩毒者林季军。同年，他凭借微电影《代驾》中邓城一角获得北京大学电影节第五届影评大赛剧情单元社会组“最佳男演员”奖。2015年11月16日，第4届北京电影学院导演系学生导演奖颁奖礼在京举行，由学生导演沙漠执导、田小洁主演的电影《有的人》获得“特邀评委会金奖”，田小洁也凭此片获得导演系颁发的“导演系特别荣誉奖”。在2016年播出的《两个女匪王》中田小洁演绎了一个做事优柔寡断毫无主见，但却偏爱女色嗜大烟为命的土匪大当家，证明了他戏路的宽广和塑造角色的实力演技。

2018年4月8日，田小洁在中央广播电视总台推出的现实题材电视剧《阳光下的法庭》中饰演穆国柱。2020年5月，田小洁出演新职场现实题材剧《在不安的世界安静地活》刘长波一角，该剧改编自时尚圈红人王欣所著的同名小说，讲述了一群年轻出版人在改革开放的时代洪流中摸索前行的故事，田小洁十分感谢导演和合作演员带来的创作氛围。同年，他参演了国内首部根据真实事件改编，以缉毒干警亲身经历为依据讲述女缉毒警卧底前线的犯罪电视剧《卧底警花》。2020年9月，他在电视剧《沉默的真相》中饰演陈明章，该剧讲述了一位检察官历经多年光阴只为查清真相的故事，在豆瓣有9.0的评分。

2021年5月，田小洁在重大革命历史题材剧《光荣与梦想》中友情出演杜聿明，该剧是“理想照耀中国——国家广播电视总局庆祝中国共产党成立100周年电视剧展播”重点剧目。6月，田小洁主演电视剧《我们的新时代》中《美丽的你》单元于海洋一角，该单元讲述了社区志愿者无私奉献的故事，展现了伟大时代下优秀基层党员的平凡人生。9月26日，他参演的电视剧《功勋》播出。12月，田小洁与张若昀、胡军、李庚希等共同出演武侠励志剧《雪中悍刀行》，他饰演了魏叔阳，该剧改编自烽火戏诸侯同名小说，讲述一位世家子弟徐凤年历经磨难最终成长为北凉王的故事。2022年1月7日，他与吴涵伊、于震共同主演的惊悚片《屋内有人》在中国大陆上映。同年2月，田小洁在电视剧《我们俩的婚姻》中饰演丁平山，该剧讲述一对年轻夫妻在职场交锋和情感碰撞中各自成长，最终学会以更加成熟的方式面对生活的故事。

2022年4月，田小洁搭档张译、王俊凯主演的悬疑剧《重生之门》播出，他饰演人狠话不多的丁生火，他为演好人物出场的戏反复读剧本使自己进入状态，反复思考自己如何让角色有生命力，注重刻画其心理通过表演“缝隙”二度创作使角色形象更丰满，最终他凭借该角色成功出圈。5月，他在都市爱情悬疑剧《安娜的爱人》中饰演朴教授，该剧讲述爱情与现实的冲突、谎言和真相的纠葛故事。8月，田小洁在电影《因为有了你》中主演谷文昌，片中的谷文昌立党为公、一心为民，帮助东山百姓解除兵灾之痛、摆脱风沙之苦。同月，他饰演了首部聚焦党的十八大以来中国制造业高质量发展的工业题材剧《麓山之歌》中麓山重工总经理明德江，该剧讲述了国有上市公司麓山重工的两代重工人克服困难实现创新智造的故事，芒果TV播放量超1.7亿，知乎评分9.1，CCData全国网央卫全天电视剧收视率高达3.81%、市占份额高达8.52%双居第一。同月11日，田小洁出演的电视剧《冰雨火》播出。10月10日，田小洁参演的电视剧《我们这十年》多平台播出。同年12月7日，田小洁参演的电视剧《县委大院》播出。

2023年4月14日，田小洁主演的电影《暴风》在全国上映。5月7日，田小洁参演的电视剧《外婆的新世界》在中国大陆首播。5月31日，田小洁等主演的《卧底警花》登陆北京卫视，以及腾讯视频、爱奇艺、搜狐视频、乐视网等网络播出平台。12月30日，田小洁参演的电视剧《藏海戏麟》开机并官宣阵容。

2024年4月6日，他参演的电视剧《手术直播间》播出，在剧中饰演谢宁。4月18日，田小洁友情出演的电视剧《没有我的城》官宣定档于4月21日在东方卫视播出。4月27日，田小洁主演的悬疑剧情《微暗之火》播出。6月17日，由田小洁特别主演的电视剧《枭起青壤》首发剧照，其在剧中饰演蒋百川。12月29日，田小洁参演的电视剧《蔷薇风暴》播出。

2003年与曾萍结婚，后因聚少离多离婚。2021年与江珊结婚。

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田小洁并不高产，出演的角色也并非都是男主角，但每一个角色的出场，都会给观众留下深刻的印象。田小洁在《黎明之前》中饰演大反派李伯涵，集沉稳果断和老谋深算于一身，非常出彩。（新京报评）

田小洁以塑造人物见长，荧幕形象堪称百变。从《激情燃烧的岁月》里忧郁内敛的文艺小青年谢枫，到《黎明之前》中心狠手辣的资深特务李伯涵，再到《乱世三义》中义比天高的大哥索智义，等等一系列性格迥异的人物都给观众留下了深刻印象。（新浪娱乐评）

在演戏上，田小洁的表演有一如既往的水准，让人感觉举重若轻，发挥稳定，演谁像谁。田小洁比较腼腆，自认外在条件不行，在表演学习上付出了很多努力，同时，他是个不争的人，演配角多过主角。（澎湃新闻评）