信使核糖核酸，中文译名“信使核糖核酸”，是由脱氧核糖核酸的一条链作为模板转录而来的、携带遗传信息能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸。

以细胞中基因为模板，依据碱基互补联会原则转录生成mRNA后，mRNA就含有与DNA分子中某些功能片段相对应的碱基序列，作为蛋白质生物合成的直接模板。mRNA虽然只占细胞总RNA的2%~5%，但种类最多，并且代谢十分活跃，是半衰期最短的一种RNA，合成后数分钟至数小时即被分解。

美国食品药品监督管理局(美国食品药品监督管理局)于2020年12月11日授权一款运用mRNA(信使核糖核酸)技术研制的新型冠状病毒疫苗的紧急使用许可。2022年2月，南非一公司3日对当地媒体表示，该公司利用已公开的新冠疫苗核酸序列，开发出非洲大陆首款mRNA（信使核糖核酸）新冠疫苗，计划今年底前开展临床试验。

信使核糖核酸

信使RNA是指导蛋白质生物合成的直接模板。mRNA 占细胞内RNA总量的2%~ 5%，种类繁多，其分子大小差别非常大。信使RNA（mRNA）是一大类RNA分子，它将遗传信息从脱氧核糖核酸传递到核糖体，在那里作为蛋白质合成模板并决定基因表达蛋白产物肽链的氨基酸序列。 RNA聚合酶将初级转录物mRNA（称为前mRNA）转录成加工过的成熟mRNA，这种成熟的mRNA被翻译成蛋白质。

如在DNA中一样，mRNA遗传信息也保存在核酸序列中，其被排列成由每个三个核苷酸碱基对组成的密码子。每个密码子编码特定氨基酸，但终止密码子例外，因为其终止蛋白质合成。

将密码子翻译成氨基酸的过程需要另外两种类型的核糖核酸：转运RNA（tRNA）和核糖体RNA（rRNA）。tRNA介导密码子的识别并提供相应的氨基酸，rRNA是核糖体蛋白质制造机械的核心组成部分。

mRNA的存在首先由Jacques Monod和FrançoisJacob提出，随后由Jacob，Sydney Brenner和Matthew Meselson于1961年在加州理工学院发现。

原核生物和真核生物mRNA有不同的特点

原核生物mRNA常以多顺反子的形式存在。真核生物mRNA一般以单顺反子的形式存在。

原核生物mRNA的转录与翻译一般是偶联的，真核生物转录的mRNA前体则需经转录后加工，加工为成熟的mRNA与蛋白质结合生成信息体后才开始工作。

原核生物mRNA半寿期很短，一般为几分钟，最长只有数小时（RNA噬菌体中的RNA除外）。真核生物mRNA的半衰期较长，如胚胎中的mRNA可达数日。

原核生物与真核生物mRNA的结构特点也不同。真核生物mRNA具有5‘帽子和3’多聚A尾巴，原核生物没有这样的首尾结构。

单顺反子与多顺反子mRNA

翻译产物仅是单个蛋白质链（多肽）的mRNA称为单顺反子mRNA。大多数真核mRNA都属于单顺反子mRNA。多顺反子mRNA携带几个开放阅读框（ORF），每个开放阅读框都能被翻译成一条多肽，这些多肽通常具有相似的功能，通常构成最终复合蛋白的不同亚基。这些多肽链对应的脱氧核糖核酸片断则位于同一转录单位内，享用同一对起点和终点。细菌和古菌中的大多数mRNA是多顺反子的。

mRNA的环化

在真核生物中，由于eIF4E和poly（A）结合蛋白之间的相互作用，mRNA分子形成环状结构，这两种结合蛋白都与eIF4G结合，形成mRNA-蛋白mRNA桥。环化促进核糖体在mRNA上的循环，提高翻译效率，且确保仅有完整的mRNA得到翻译。

储存在DNA分子中的这种遗传信息能在复制中产生更多的拷贝，并翻译成蛋白质。脱氧核糖核酸的功能构成了信息的流动，遗传信息如何转变成蛋白质呢？转录就是其中的重要的一环。基因表达时以DNA的一条链为模板合成核糖核酸，这一过程就是转录（transcription）。催化合成RNA的酶叫做RNA聚合酶（RNA polymerase）。RNA和DNA结构相似，所不同之处在于：⑴RNA一般以单链形式存在；⑵RNA中的核糖其C′-2不脱氧；⑶尿苷（U）取代了DNA中的胸苷。细胞中的RNA分成三种：mRNA（信使RNA），转运RNA（转运RNA）和rRNA（核糖体RNA）。它们的功能各不相同。mRNA是合成蛋白质的模板，tRNA是转运特异氨基酸的运载工具，rRNA是合成蛋白质的装置。mRNA的碱基序列，决定着蛋白质装配时氨基酸的序列。

1955年Brachet用洋葱根尖和阿米巴虫进行了实验；若加入核糖核酸酶降解细胞中的RNA，则蛋白质合成就停止，若再加入从酵母中提取的RNA，则又可以重新合成一些蛋白质，这就表明，蛋白质的合成是依赖于RNA。

同年Goldstein和Plaut用同位素标记变形虫（阿米巴虫 proteus）RNA前体，发现标记的RNA都在核内，表明RNA是在核内合成的。在标记追踪（pulse-chase）实验中，用短脉冲标记RNA前体，然后将细胞核转移到未标记的阿米巴虫中。经过一段时间发现被标记的核糖核酸分子已在细胞质中，这就表明RNA在核中合成，然后转移到细胞质内，而蛋白质就在细胞质中合成，因此RNA就成为在脱氧核糖核酸和蛋白质之间传递信息的信使的最佳候选者。

1956年Elliot Volkin和 Lawrence Astrachan作了一项很有意思的观察：当E.coli被T2感染，迅速停止了RNA的合成，但噬菌的RNA却开始迅速合成。用同位素脉冲一追踪标记表明噬菌的RNA在很短的时间内就进行合成，但很快又消失了，表明RNA的半衰期是很短的。由于这种新合成的核糖核酸的碱基比和T2的DNA碱基比相似，而和细菌的碱基比不同，所以可以确定新合成的RNA是T2的RNA。由于T2感染细菌时注入的是脱氧核糖核酸，而在细胞里合成的是RNA，可见DNA是合成RNA的模板。最令人信服的证据来自DNA-RNA的杂交实验。Hall.B.D和Spiegeman,S，将T2噬菌体感染E.coli后立即产生的RNA分离出来，分别与T2和E.coli的DNA进行分子杂交，结果发现这种RNA只能和T2的DNA杂交形成“杂种”链，而不能和E.coli的DNA进行杂交。表明T2产生的这种核糖核酸（即mRNA）至少和T2的DNA中的一条链是互补的。

Brenner,s. Jacob,F.和Meselson(1961）进行了一系列的的实验（图12-2），他们将E.coli培养在15N/13C的培养基中，因此合成的RNA和蛋白都被“重”同位素所标记。也就是说凡是“重”的核糖体，RNA和蛋白都是细菌的，然后用T2感染E.coli，细菌的RNA停止合成，而开始合成T2的RNA此时用普通的“轻”培养基（14N/12C），但分别以32P来标记新合成的T2 RNA，以35S标记新合成的T2蛋白，因此任何重新合成的核糖体，RNA，及蛋白都是“轻”的但带但有放射性同位素。经培养一段时间后破碎细胞，加入过量的轻的核糖体作对照，进行密度梯度离心，结果“轻”的核糖体上不具有放射性，“重”的核糖体上具有32P和35S，表明⑴T2未合成核糖体，“轻”核糖体却是后加放的。⑵T2翻译时是借用了细菌原来合成的核糖体，所以核糖体并无特异性，核糖体上结合的mRNA，其序列的特异性才是指导合成蛋白质的遗传信息，从而提出了mRNA作为“信使”的证据。因此他们将这种能把遗传信息从脱氧核糖核酸传递到蛋白质上的物质称为“信使”。他们预言⑴这种“信使”应是一个多核苷酸；⑵②其平均分子量不小于5´105（假定密码比是3），足以携带一个基因的遗传信息；⑶它们至少是暂时连在核糖体上；⑷其碱基组成反映了DNA的序列；⑸它们能高速更新。Volkin和Astrachan发现高速更新的核糖核酸似乎完全符合以上条件。jacob和Monod将它定名为信使RNA（Messenger RNA）或mRNA。

转录是指由脱氧核糖核酸合成RNA的过程。在转录期间，RNA聚合酶根据需要将一个基因的DNA拷贝成mRNA，这个过程在真核生物和原核生物中是相似的。

与原核生物明显不同的是，真核RNA聚合酶在转录过程中与mRNA加工酶结合，因此，真核生物的mRNA加工可以在转录开始后快速进行。短寿命的未加工或部分加工的转录产品称为前体mRNA或pre-mRNA；一旦加工完全，它被称为成熟mRNA。

真核pre-mRNA加工

mRNA的加工在真核生物、细菌和古菌中差异很大。实质上，非真核mRNA在转录时是成熟的，除极少数情况外不需要加工。然而，真核生物pre-mRNA需要大量加工。

5’端加帽子：5‘ 帽（也称为核糖核酸帽，RNA 7-甲基鸟苷帽或RNA m7G帽）就是一个经修饰的鸟苷酸，在转录开始不久后就被添加到新产生的真核mRNA的“前”即5'末端。 5’帽由末端7-甲基鸟苷残基组成，它通过5'-5'-三磷酸键与第一转录出的核苷酸连接。它的存在对于核糖体的识别和对mRNA的保护至关重要。

3’端加尾：是指聚腺苷基部分与mRNA分子的共价连接。在真核生物中，大多数信使RNA（mRNA）分子在3'末端被多聚腺苷酸化。Poly A尾巴和与其结合的蛋白质有助于保护mRNA免于被外切酶降解。3’端加尾对于转录终止，从细胞核输出mRNA和翻译也很重要。 原核生物中的mRNA也常被3’端加尾，但此时的poly（A）尾巴促进而不是防止核酸外切酶对mRNA的降解。

mRNA的转运

真核生物和原核生物之间的另一个区别是mRNA的转运。由于真核转录和翻译是在不同的细胞器内进行的，真核mRNA必须从细胞核输出到细胞质。 这一过程可能受不同信号通路的调节。成熟的mRNA通过其加工的修饰被识别，在结合帽结合蛋白CBP20和CBP80及转录/输出配位化合物（TREX）后通过核孔被输出到细胞质。

mRNA的翻译

因为原核mRNA不需要加工或转运，所以原核生物mRNA在核糖体的翻译可以在转录结束后立即开始。因此，可以说原核生物的mRNA翻译与转录偶联发生。

已经加工并转运至细胞质的真核生物mRNA（即成熟mRNA）在核糖体的翻译发生在细胞质中自由漂浮的核糖体中，或者通过信号识别颗粒导向到的内质网中。因此，与原核生物不同，真核生物的mRNA翻译不直接与转录偶联。在某些情况下甚至可能发生这样的情况，即mRNA水平的降低却伴随着蛋白质水平的增加。

相关课程

第一节脱氧核糖核酸转录生成核糖核酸

一、定义

一转录单位

二启动子（助催化剂）

三终止子（terminator）

二、RNA聚合酶

一酶的特性：以4种NTP为底物，需模板和镁离子，合成方向也是5 ’－3’，但不需要引物。

二酶的分类：

1．噬菌体的RNA聚合酶结构简单，是单链蛋白，功能也简单。

2．细菌则具有复杂的多亚基结构（450Kd），可识别并转录超过1000个转录单位。

3．真核生物的酶有多种，根据a－鹅膏碱（环状8肽，阻断核糖核酸延伸）的抑制作用可分为三类：聚合酶A对它不敏感，分布于核仁，转录核糖体RNA；聚合酶B对低浓度敏感，存在于核质，转录信使RNA；聚合酶C位于核质，对高浓度敏感，转录小分子量RNA，如转运RNA、5SRNA等。各种RNA聚合酶都是由10-15种不同亚基组成的多亚基配位化合物。

4．线粒体和叶绿体也有RNA聚合酶，结构简单，能合成所有种类RNA。

三酶的构成：大肠杆菌的全酶有5个亚基（α2ββ’ωσ），含2个锌。β催化形成磷酸二键，β’结合模板，σ亚基称为起始因子，可使RNA聚合酶稳定地结合到启动子上。ββ’ωσ称为核心酶。σ亚基在不同菌种间变动较大，而核心酶比较恒定。酶与不同启动子的结合能力不同，不同启动因子可识别不同的启动子。σ70识别启动子共有序列，σ32识别热休克基因，σ60在氮饥饿时起作用。σ通过随机移动起作用，不需解链。

四模板：以完整双链脱氧核糖核酸为模板，其中仅一条链可转录。转录时局部解链，转录后DNA重新形成双螺旋结构，所以DNA是全保留的。

三、转录过程

分为起始、延长和终止三个阶段。起始包括对双链DNA特定部位的识别、局部（17bp）解链以及在最初两个核苷酸间形成磷酸二酯键。第一个核苷酸掺入的位置称为转录起点。

起始后起始因子离开，核心酶构象改变，沿模板移动，转录生成杂交双链（12bp）。随后DNA互补链取代核糖核酸链，恢复DNA双螺旋结构。延伸速度为50nt/s，酶移动17nm。错误几率为10-5。

聚合酶到达终点时，在终止辅助因子的帮助下停止反应，酶和RNA链脱落，转录结束。

四、启动子和转录因子

一定义：酶识别、结合、开始转录的一段脱氧核糖核酸序列。强启动子2秒钟启动一次转录，弱启动子10分钟一次。

二原核生物：大肠杆菌在起点上游约－10核苷酸碱基对处有保守序列TATAAT，称为pribnow box，有助于局部解链。在其上游还有TTGACA，称为－35序列，提供核糖核酸聚合酶识别的信号。

三真核生物：复杂，差异较大。

1．信使RNA的启动子通常有三个保守区，－25到－30有TATA框，是解链位置，并决定转录起点；－75位置有CAAT框，与RNA聚合酶的结合有关；更上游还有GC框，某些转录因子可结合。后两个称为上游因子，对转录起始频率有较大影响；

2． 小RNA的启动子在转录区内部，有一些辅助因子帮助RNA聚合酶识别。

五、终止子和终止因子

一定义

二所有原核生物的终止子在终点之前都有一个回文结构，可使酶减慢移动或暂停合成。大肠杆菌有两类终止子：

1． 简单终止子，回文区有一段富含GC对的序列，回文后有寡聚尿苷。

2．依赖ρ的终止子，必须在有ρ因子时才能发挥作用，不含GC对，也无寡聚尿苷。ρ因子是蛋白质，可与酶作用，释放核糖核酸，并使酶脱离。

三某些因子可使酶越过终止子继续转录，称为通读。常见于某些噬菌体的时序控制，早期基因与晚期基因以终止子相隔，早期基因产生抗终止因子，使发生通读以表达晚期基因。

六、转录的调控

一遗传信息的表达有时序调控和适应调控，转录水平的调控是关键环节，因为这是表达的第一步。转录调控主要发生在起始和终止阶段。

二操纵子是细菌基因表达和调控的单位，有正调节和负调节因子。阻遏蛋白的作用属于负调控。环腺苷酸通过其受体蛋白（CRP）促进转录，可促进许多诱导酶的合成。操纵子可构成综合性调控网络，如SOS反应等。对终止子也有调控作用，如衰减子。

三真核生物不组成操纵子，而是通过激素、生长因子等进行调控。某些脱氧核糖核酸序列对转录起增强作用，称为增强子。

第二节转录后加工

一、原核生物

一核糖体核糖核酸：大肠杆菌共有7个核糖体RNA的转录单位，每个转录单位由16S、23S、5SRNA和若干转运RNA基因组成。16S和23S之间常由转运RNA隔开。转录产物在RNA酶III的作用下裂解产生核糖体RNA的前体P16和P23，再由相应成熟酶加工切除附加序列。前体加工时还进行甲基化，产生修饰成分，特别是a-甲基核苷。N4,2’-O二甲基胞苷（m4Cm）是16S核糖体RNA特有成分。5S核糖体RNA一般无修饰成分。

二转运RNA：有60个基因，其加工包括：

1．内切酶在两端切断，大肠杆菌核糖核酸酶P是5’成熟酶；

2.外切酶从3’修剪，除去附加顺序。RNA酶D是3’成熟酶；

3．3’端加上CCAOH，由转运RNA核苷酰转移酶催化，某些转运RNA已有，切除附加序列后即露出；

4．核苷的修饰：修饰成分包括甲基化碱基和假尿嘧啶核苷，修饰酶具有高度特异性。甲基化对碱基和序列都有严格要求，一般以腺苷甲硫氨酸为甲基供体。

三信使RNA：细菌多数不用加工，转录与翻译是偶联的。也有少数多顺反子信使RNA必须由内切酶切成较小的单位，然后翻译。如核糖体大亚基蛋白与RNA聚合酶的b亚基基因组成混合操纵子，转录后需经RNA酶III切开，各自翻译。因为核糖核酸聚合酶的合成水平低得多，切开有利于各自的翻译调控。较长的RNA会产生高级结构，不利于翻译，切开可改变其结构，从而影响其功能。

二、真核生物生物

一核糖体RNA：基因拷贝数多，在几十到几千之间。基因成簇排列在一起，由RNA聚合酶I转录生成一个较长的前体，哺乳动物为45S。核仁是rRNA合成与核糖体亚基生物合成的场所。RNA酶III等核酸内切酶在加工中起重要作用。5SRNA基因也是成簇排列的，由RNA聚合酶III转录，经加工参与构成大亚基。核糖体核糖核酸可被甲基化，主要在核苷2’羟基，比原核生物甲基化程度高。多数核糖体RNA没有内含子，有些有内含子但不转录。

二转运RNA：由RNA聚合酶III转录，加工与原核相似，但3’端的CCA都是后加的，还有2’-O-甲基核糖。

三信使RNA：真核生物生物编码蛋白质的基因以单个基因为转录单位，但有内含子，需切除。信使RNA的原初转录产物是分子量很大的前体，在核内加工时形成大小不等的中间物，称为核内不均一RNA(hn核糖核酸）。其加工过程包括：

1．5’端加帽子：在转录的早期或转录终止前已经形成。首先从5’端脱去一个磷酸，再与GTP生成5’，5’三磷酸相连的键，最后以腺苷甲硫氨酸进行甲基化，形成帽子结构。帽子结构有多种，起识别和稳定作用。

2． 3’端加尾：在核内完成。先由RNA酶III在3’端切断，再由多聚腺苷酸聚合酶加尾。尾与通过核膜有关，还可防止外切酶降解。

3． 内部甲基化：主要是6-甲基6-氨基嘌呤，在hn核糖核酸中已经存在。可能对前体的加工起识别作用。

三、RNA的拼接

一转运RNA的拼接：由酶催化，酶识别共同的二级结构，而不是序列。通常内含子插入到靠近转运RNA处，与反密码子联会，取代反密码子环。第一步由内切酶切除插入序列，不需ATP；第二步由RNA连接酶连接，需要ATP。

二四膜虫核糖体RNA的拼接：某些四膜虫26S核糖体RNA基因中有一个内含子，其拼接只需一价和二价阳离子及鸟苷酸或鸟苷存在即可自发进行。其实质是磷酸酯的转移反应，鸟苷酸起辅助因子的作用，提供游离3’羟基。

三信使RNA：真核生物编码蛋白质的核基因的内含子属于第二类内含子，左端为GT，右端为AG。先在左端切开，产生的5’末端与3’端上游形成5’，2’-磷酸二酯键，构成套索结构。然后内含子右端切开，两个外显子连接起来。通过不同的拼接方式，可形成不同的信使核糖核酸。

第三节RNA的复制

一、噬菌体QbRNA的复制

其RNA是单链，正链，侵入大肠杆菌后立即翻译，产生复制酶的b亚基，与宿主的三个亚基（α为核糖体蛋白，γ、δ均为肽链延长因子）构成复制酶，进行复制。先以正链为模板合成负链，再根据负链合成正链。合成负链时需要宿主的两个蛋白因子，合成正链则不需要，所以可大量合成。病毒的蛋白质合成受RNA高级结构的调控。

二、病毒RNA复制的主要方式

一病毒含正链RNA，先合成复制酶，复制后合成其他蛋白质进行装配。如噬菌体Qb及灰质炎病毒。

二病毒含负链和复制酶，先合成正链，再合成病毒蛋白和复制病毒核糖核酸。如狂犬病毒。

三病毒含双链RNA和复制酶，如呼肠孤病毒科。先复制正链，再翻译成病毒蛋白，最后合成负链，形成双链RNA分子。

四致癌RNA病毒：如白血病病毒和肉瘤病毒，先逆转录生成脱氧核糖核酸前病 毒，再转录、翻译。

第四节RNA生物合成的抑制剂

一、碱基类似物

有些人工合成的碱基类似物能干扰和抑制核酸的合成。作用方式有以下两类：

一作为代谢拮抗物，直接抑制核苷酸生物合成有关酶类。如6-基嘌呤进入体内后可转变为巯基嘌呤核苷酸，抑制嘌呤核苷酸的合成。可作为抗癌药物，治疗急性白血病等。此类物质一般需转变为相应的核苷酸才能表现出抑制作用。

二进入核酸分子，形成异常核糖核酸或DNA，影响核酸的功能并导致突变。5-尿类似尿嘧啶，可进入RNA，与腺嘌呤联会或异构成烯醇式与鸟嘌呤配对，使A-T对转变为G-C对。因为正常细胞可将其分解，而癌细胞不能，所以可选择性抑制癌细胞生长。

二、脱氧核糖核酸模板功能抑制物

一烷化剂：带有活性烷基，能使DNA基化。鸟嘌呤烷化后易脱落，双功能烷化剂可造成双链交联，磷酸基烷化可导致DNA链断裂。通常有较大毒性，引起突变或致癌。

二放线菌素类：可与DNA形成非共价配位化合物，抑制其模板功能。包括一些抗癌抗生素。

三嵌入染料：含有扁平芳香族生色团，可插入双链DNA相邻核苷酸碱基对之间。常含丫啶或菲啶环，与碱基大小类似，可在复制时增加一个核苷酸，导致移码突变。如溴乙啶。

三、RNA聚合酶抑制剂

一利福霉素：抑制细菌核糖核酸聚合酶活性。

二利链菌素：与细菌RNA聚合酶b亚基结合，抑制RNA链的延长。

a-鹅膏蕈碱：抑制真核生物生物RNA聚合酶。

mRNA分子的合成始于转录，并最终以降解结束。在被翻译之前，真核mRNA分子通常需要大量加工和转运，而原核生物mRNA分子则不需要。真核mRNA分子和它周围的蛋白质一起被称为信使RNP。

同一细胞内的不同mRNA具有不同的寿命（稳定性）。在细菌细胞中，单个mRNA可以存活数秒至超过一小时，但平均寿命为1至3分钟，因此，细菌mRNA的稳定性远低于真核mRNA。哺乳动物细胞mRNA的寿命从几分钟到几天不等。mRNA的稳定性越高，从该mRNA产生的蛋白质越多。 mRNA的有限寿命使细胞能够快速改变蛋白质合成以响应其不断变化的需求。有许多机制可导致mRNA的降解。

原核生物mRNA的降解是不同核糖核酸酶包括核酸内切酶，3'外切酶和5'核酸外切酶的共同作用的结果。在一些情况下，长度为数十至数百个核苷酸的小RNA分子（sRNA）可通过与互补序列碱基联会来促进RNase III对特定mRNA的降解。

真核生物的翻译和mRNA衰变之间存在着平衡。正在被翻译的mRNA被核糖体，真核起始因子eIF-4E和eIF-4G以及poly（A）结合蛋白结合，不能接触外泌体复合物，mRNA得到保护。mRNA的poly（A）尾巴被特异性外切核酸酶缩短，该外切酶通过RNA上的顺式调节序列和反式，反式－己二烯二酸作用RNA结合蛋白的组合定位到特定mRNA。 Poly（A）尾巴被去除破坏了mRNA的环状循环结构并降低了帽结合复合体的稳定性，导致m核糖核酸会被外来体复合物或脱帽复合物降解。通过这种方式，可以快速降解翻译不活跃的mRNA，而翻译活跃的mRNA不受影响。

在后生生物中，由Dicer产生的小干扰RNA（siRNA）被整合到称为RNA诱导沉默配位化合物（RISC）。该复合物含有内切核酸酶，切割与siRNA结合的完全互补的mRNA，产生的片段然后被外切酶降解。 siRNA通常用于实验室细胞培养中阻断基因的功能。SiRNA被认为是病毒先天免疫系统的一部分，可以用于对双链RNA病毒的防御。

微小RNA（miRNA）是小RNA，通常与后生生物mRNA中的序列部分互补。 miRNA与m核糖核酸的结合可以抑制该mRNA的翻译并加速poly（A）尾部去除，从而加速mRNA降解。

从 (脱氧核糖核酸）转录合成的带有遗传信息的一类单链（RNA），他作为蛋白质合成的模板，决定了核糖体合成肽链的种类。1961年F.雅各布和根据大肠杆菌诱导酶生成的实验结果提出：信息从DNA到蛋白质之间的转移，必需有一种RNA起传递作用，由此提出了信使核糖核酸的名称。

生物体内的每种多肽链都由特定的mRNA编码，所以细胞内mRNA的种类很多，但通常每种m核糖核酸的拷贝数极少（1～10个）。根据信息密码学说，3个连续的核苷酸可以编码一个氨基酸，因此从已知mRNA（或脱氧核糖核酸）核苷酸顺序可以准确推导出蛋白质的一级结构。

存在范围和性质

mRNA存在于原核生物和真核生物的细胞质及真核细胞的某些细胞器（如和）中。RNA病毒和RNA噬菌体中的 RNA既是遗传信息的载体又具有mRNA的功能。生物体mRNA种类的多少与生物进化水平有关，高等生物所含的遗传信息多，mRNA的种类也多。生物体内某种mRNA的含量根据需要而有不同，如5龄蚕后部丝腺体的主要任务是快速合成大量丝心蛋白，因而编码丝心蛋白的mRNA含量特别多。有些细菌需要不断适应外部环境，其体内编码某些诱导酶的mRNA的含量也较多。

原核生物和真核生物mRNA不同的特点

①原核生物mRNA常以多顺反子（见）的形式存在，即一条mRNA链编码几种功能相关联的蛋白质。真核生物mRNA一般以单顺反子的形式存在，即一种mRNA只编码一种蛋白质。②原核生物mRNA的转录与翻译一般是偶联的，即转录尚未完毕，蛋白质的转译合成就已开始 真核生物转录的mRNA前体则需经后加工，加工为成熟的mRNA与蛋白质结合生成信息体后才开始工作 信息体中蛋白质与RNA之比约为3。③原核生物mRNA半寿期很短，一般为几分钟，最长只有数小时（RNA噬菌体中的RNA除外）。真核生物mRNA的半寿期较长，如胚胎中的mRNA可达数日。④原核与真核生物mRNA的结构特点也不同。

一级结构与功能的关系

原核生物mRNA一般5'端有一段不翻译区，称前导顺序，3'端有一段不翻译区，中间是蛋白质的编码区，一般编码几种蛋白质。如大肠杆菌乳糖操纵子mRNA编码3条多肽链；色氨酸操纵子mRNA编码5条多肽链。也有单顺反子形式的细菌mRNA，如大肠杆菌脂蛋白mRNA。原核生物mRNA分子中一般没有修饰核苷酸，也没有5'端帽子结构和3'端聚腺苷酸尾巴。在原核生物mRNA的起始密码子（AUG）附近（5'方向上游）的一小段长短不等的顺序，含有较多的嘌呤核苷酸，被称为SD顺序。它能和核糖体小亚基上的16SrRNA的3'端富含嘧啶核苷酸的区域联会结合，有助于带有甲酰甲硫氨酸的起始转运RNA识别mRNA上的起始密码（AUG），使肽链合成从此开始。这段顺序是1974年由J.夏因和L.达尔加诺发现的，所以称为SD顺序，也称核糖体结合部位。原核生物mRNA的编码区一般编码几种功能上相关联的蛋白质，两种蛋白质的编码区之间常有一小段不翻译的顺序，叫做间隔区。有的噬菌体RNA中2个相邻的顺反子共用一段相同的编码顺序，例如，M 噬菌体RNA中的溶菌蛋白编码区共225个核苷酸中有189个核苷酸是由相邻两个蛋白质共用的。原核mRNA与真核mRNA一样使用同一套三联体密码子（真核生物线粒体mRNA有例外）。原核生物合成氨基酸的操纵子mRNA的5' 端前导顺序上有一段顺序称作弱化子。弱化子具有两种可以互变的构象，其中一种构象是转录终止的信号，能使转录中止（或衰减）。衰减调节是原核生物合成氨基酸的调控方式之一（见）。

真核生物 mRNA（细胞质中的）一般由5'端帽子结构、5'端不翻译区、翻译区（编码区）、3'端不翻译区和3'端聚腺苷酸尾巴构成（图1a[真核生物mRNA结构示意图　a一级结构示意图]）。分子中除 G构成帽子外，常含有其他修饰核苷酸，如 A等。5'端帽子结构通常有3种类型，即：G(5'）ppp(5')N； G(5')ppp(5') N和 G(5')ppp(5'） N。图1b[真核生物mRNA结构示意图b 5'端帽子结构式，，表示碱基]，表示碱基" class=image\u003e[] 是帽子的化学结构，N右边的m代表核糖2'位羟基的甲基化。真核细胞线粒体中的mRNA无帽子结构。一般认为帽子的功能与翻译的启动有关。许多真核生物 mRNA（如珠蛋白mRNA）除去帽子后翻译效率大大降低。5'端不翻译区，也叫前导顺序。不同的真核mRNA的前导顺序长度不同，有的只有10个核苷酸，有的则有200个核苷酸。与原核生物mRNA相似，真核mRNA5'端不翻译区中常有一段顺序与核糖体小亚基上的18SrRNA的3'端的一段顺序互补并结合，这种结合与真核mRNA的翻译启动有关。

翻译区（编码区）使用的密码子除线粒体（如人、牛和酵母线粒体）外与原核生物mRNA是一样的。真核生物mRNA的起始密码子都是AUG。真核和原核生物mRNA使用的密码子也都有“简并现象”，即几种不同的密码子翻译出同一种氨基酸，但不同的mRNA中简并密码子的利用率是不同的，真核与原核生物生物之间的差别就更大。mRNA的终止密码子有3个（UAG、UGA和UAA），其功能是停止翻译，一般只用一个终止密码子就能使翻译停止。有的mRNA有2个连续的终止密码子（见）。3'端不翻译区的长短在不同的mRNA上有所不同，β珠蛋白mRNA只有39个核苷酸，而卵白蛋白mRNA则有637个核苷酸。真核生物mRNA3'端不翻译区常有 AAUAA(A）或AUUUA(A）等顺序，它们和识别多聚A聚合酶及装配多聚A尾巴有关。除个别组蛋白mRNA外，真核生物mRNA3'端均有多聚A尾巴 3'端多聚A尾巴的长度随来源不同而不同，且随mRNA的老化而变短，通常有20～200个A。多聚A与mRNA稳定性及mRNA从细胞核转到细胞浆中有关。

真核生物mRNA的前体　真核生物mRNA通常都有相应的前体。从DNA转录产生的原始转录产物可称作原始前体（或mRNA前体）。一般认为原始前体要经过hnRNA核不均-RNA的阶段，最终才被加工为成熟的 mRNA。hnRNA上的蛋白质编码区被一些居间顺序分隔成若干段；不同的基因转录产物所含的居间顺序的数目不同，人胰岛素只有两个，而牛眼的晶体蛋白则含有数十个；居间顺序的长短也各不相同，从数十个到上千个核苷酸（鸡卵白蛋白有一个1550个核苷酸的居间顺序）。居间顺序将在剪接过程中去除。约有10～40%的hnRNA含有3′端多聚A尾巴。hnRNA经过进一步加工切除居间顺序并把分隔的蛋白质编码区连接起来，最终成为成熟的mRNA。

二级结构与功能的关系

通常m核糖核酸（单链）分子自身回折产生许多双链结构（图2 [噬菌体M RNA中成熟蛋白] RNA中成熟蛋白" class=image\u003e[编码区的二级结构及外壳蛋白的起始密码子 AUG的位置]）。原核生物，例如M 噬菌体RNA外壳蛋白编码区，经计算有66.4%的核苷酸以双链结构的形式存在。M RNA能翻译4种蛋白质，但效率各不相同。在通常条件下翻译外壳蛋白（其编码区在成熟蛋白的下游）的效率高于成熟蛋白的效率。但用甲醛处理M RNA破坏二级结构后，则翻译成熟蛋白的效率提高。图2[噬菌体M RNA中成熟蛋] RNA中成熟蛋" class=image\u003e[白编码区的二级结构及外壳蛋白的起始密码子 AUG的位置] 中外壳蛋白的起始密码子 AUG(1335～1337）通常处于环（Loop）的顶端，暴露在外面，因而易于与翻译的启动因子结合而进行翻译。成熟蛋白的编码区尽管处在外壳蛋白的前面，但其起始密码子GUG(130～132）却埋在二级结构之中，故翻译效率低，只有将二级结构松开（如甲醛处理）之后才能被翻译。可见mRNA分子的二级结构对翻译蛋白质的效率有很大影响。

真核生物mRNA也具有丰富的二级结构，如鸭珠蛋白mRNA和兔珠蛋白mRNA分别有45～60%和55～62%的核苷酸残基处在碱基联会之中。在真核生物蛋白质启动配位化合物中，40S核糖体实际上覆盖着mRNA上包括帽子结构在内的50～54个核苷酸，但是40S核糖体的大小比50个核苷酸的长度小得多 由于形成的发夹结构（二级结构使帽子与起始密码子之间的空间距离缩短）（图3[真核生物mRNA ]），造成40S核糖体能够覆盖包括帽子结构和起始密码子 AUG在内的50多个核苷酸，从而启动蛋白质合成。不同的mRNA中发夹结构的有无或多少各不相同。在蛋白质合成肽链继续延伸时，不需要帽子结构参加，此时核糖体覆盖的mRNA的区域约为25～35个核苷酸，m核糖核酸的构象已不同于启动阶段而是处于一种伸展的状态，从而有利于转译的延续。可见，折叠起来的mRNA二级结构有利于蛋白质合成的启动，以后mRNA处于伸展的状态则有利于转译的继续。

简介

遗传信息从脱氧核糖核酸分子抄录到RNA分子中的过程称为转录（transcription）。在真核生物中，最初转录生成的RNA称为核不均一RNA（heterogeneous nuclear RNA，hnRNA），然而在细胞浆中起作用，作为蛋白质的氨基酸序列合成模板的是m核糖核酸（messenger RNA）。hnRNA是mRNA的未成熟前体。两者之间的差别主要有两点：一是hnRNA核苷酸链中的一些片段将不出现于相应的mRNA中，这些片段称为内含子（intron），而那些保留于mRNA中的片段称为外显子（exon）。也就是说，hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，被去掉了一些片段，余下的片段被重新连接在一起；二是mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸（polyA）尾巴。mRNA从5′末端到3′末端的结构依次是5′帽子结构，5′末端非编码区，决定多肽氨基酸序列的编码区，3′末端非编码区，和多聚腺苷酸尾巴。多聚腺苷酸尾一般由数十个至一百几十个腺苷酸连接而成。随着m核糖核酸存在时间的延续，这段聚A尾巴慢慢变短。因此，目前认为这种3′末端结构可能与增加转录活性以及使mRNA趋于相对稳定有关。原核生物的mRNA没有这种首、尾结构。

1961年，Jacob和Monod首先提出了mRNA的概念。在真核生物中，由于蛋白质是在胞浆中而不是在核内合成，因此显然要求有一个中间物将脱氧核糖核酸上的遗传信息传递至胞浆中。后来的研究证实，这种中间物即信使RNA.?mRNA的核苷酸序列与DNA序列相应，决定着合成蛋白质的氨基酸序列。它如何指导氨基酸以正确的顺序连接起来呢？不同的mRNA碱基组成和排列顺序都不同，但都只有A，G，C，U4种碱基。如果一个碱基就可以决定一个氨基酸，则只有四种变化方式，如果两个碱基决定一个氨基酸，则只有16种变化方式，都不能满足20种氨基酸的需要。1961年Crick和Brenner的实验得出了三个核苷酸编码一个氨基酸的结论，并将这种三位一体的核苷酸编码称做遗传密码（genetic code）或三联体密码，这样就可以有64种不同的密码，但此情况下必须假定有一些氨基酸使用两个以上的密码。这一假定很快就被证明是对的。

遗传密码具特征

1．三个核苷酸组成一个密码子，每个密码子由三个前后相联的核苷酸组成，一个密码子只为一种氨基酸编码。共有64个密码子；

2．密码子之间不重叠使用核苷酸，也无核苷酸间隔；

3．一种氨基酸可有多个密码子，这个特点称为密码子的简并性；

4．密码子的通用性，所有生物从最低等的病毒直至人类，蛋白质合成都使用同一套密码子表（表15-8），仅有极少的例外，如特殊细胞器线粒体，叶绿体所用的密码稍有不同。

通用遗传密码及相应的氨基酸

第一个核苷酸5′　 第二个核苷酸　 第三个核苷酸3′

U　 C　 A　 G

U　 L-苯丙氨酸　 丝氨酸　 酪氨酸　 半胱氨酸　 U

苯丙氨酸　 丝氨酸　 酪氨酸半胱氨酸　 C

亮氨酸　 丝氨酸　 终止码　 终止码　 A

亮氨酸　 丝氨酸　 终止码　 色氨酸　 G

C　 亮氨酸　 L-脯氨酸　 组氨酸的生物合成精氨酸　 U

亮氨酸　 脯氨酸　 组氨酸　 精氨酸　 C

亮氨酸　 脯氨酸谷氨酰胺　 精氨酸　 A

亮氨酸　 脯氨酸　 谷氨酰胺　 精氨酸　 G

A　 异亮氨酸　 Thr天冬酰胺　 丝氨酸　 U

异亮氨酸　 苏氨酸　天冬酰胺　 丝氨酸　 C

异亮氨酸　 苏氨酸　 赖氨酸　 精氨酸　 A

甲硫氨酸　 苏氨酸　 赖氨酸　 精氨酸　 G

G　 氨酸　 β-氨基酸　 天门冬氨酸　 甘氨酸　 U

缬氨酸　 丙氨酸　 天冬氨酸　 甘氨酸　 C

缬氨酸　 丙氨酸　 谷氨酸　 甘氨酸　 A

缬氨酸　 丙氨酸　 谷氨酸　 甘氨酸　 G

通用遗传密码与线粒体遗传密码之间的一些差异

密码子　通用编码　 线粒体编码

哺乳动物　 果蝇　 酵母菌　 植物

UGA　 终止码　 色氨酸　 色氨酸　 色氨酸　 终止码

AUA　 异亮氨酸　 甲硫氨酸　 蛋氨酸　 蛋氨酸　 异亮氨酸

CUA　 亮氨酸　 亮氨酸　 亮氨酸　 Thr　 亮氨酸

AGA　 精氨酸　 终止码　 丝氨酸　 精氨酸　 精氨酸

注：下标横线者为与通用编码不同的编码

究竟哪一个密码子为哪一种氨基酸编码，即密码子与氨基酸之间的对应关系已在60年代研究解决了。1964年Nirenberg用一种RNA聚合酶体外合成了多聚尿苷酸、多聚腺苷酸等多聚核苷酸，将这些多聚核苷酸分别用于蛋白质的体外合成。发现，当所用的多聚核苷酸为多聚尿苷酸时，只有多聚L-苯丙氨酸合成，这意味着UUU为苯丙氨酸编码；用其它多聚核苷酸进行相应的实验后发现，CCC为L-脯氨酸编码，而AAA为赖氨酸编码；其后，有人又用核苷酸比例为已知，但是核苷酸序列随机的多聚核苷酸，以及用已知序列的含两种或两种以上核苷酸的多聚核苷酸进行相应的实验，将结果加以数理统计学处理，又解读了一批密码子，其中包括三个终止码，最后，还有一些密码子是通过合成已知序列的三聚核苷酸与核蛋白体和载有放射性同位素标记的氨基酸的转运RNA共沉淀原理予以解读的。在所有密码子中，AUG不仅为甲硫氨酸编码，而且又是翻译（translation，以mRNA上的遗传信息指导核蛋白体上多肽链合成的过程）的起始信号，UAA、UAG和UGA不为任何氨基酸编码，而是作为翻译的终止信号，统称为终止码（stop codon），又常被叫作无意义码（nonsense codon）。

大多数氨基酸是由一个以上的密码子所编码。这个事实提出了一个问题：编码同一种氨基酸的一组密码子的使用频率是否都相同？细致的分析表明，无论是原核生物，还是高等真核生物，密码子的使用频率并不是平均的，有些密码子的使用率很高，有些则几乎不使用，其使用频率主要与细胞内转运RNA含量呈正相关。

简介

转录是在原核和真核细胞中以脱氧核糖核酸为模板合成RNA的过程。

在原核和真核生物中，转录过程是相似的。包括DNA变性，RNA聚合酶结合在单链DNA上以5′→3′方向合成RNA分子。双链中只有一条链作为转录模板，合成单链RNA分子。启动子和终止子序列决定转录的起始和终止。

在E.coli中RNA多聚酶转录各种RNA（mRNA，tRNA和rRNA）。在真核细胞中有三类不同的RNA多聚酶，它们的功能不同。RNA pol Ⅰ转录4种rRNA中的3种；RNA pol Ⅱ转录mRNA和一些snRNA；RNAⅢ转录第四种rRNA，转运RNA以及其余的snRNA。

3种真核生物的RNA pol，不像E.coli RNA pol，没有一个直接地和启动子区结合，而是通过转录起始因子的介导来起始RNA的合成。对于每一种RNA多聚酶来说，转录因子是特异的，它可以识别启动子的特殊序列。

蛋白质编码基因的启动子位于转录起始位点的上游，由不同组合的启动原件所构成。特异的转录因子和调节因子结合在这些原件上，促进RNA pol Ⅱ转录起始。增强子离启动子较远，它可被调节因子识别结合，具有促进基因转录的功能。

由核糖核酸 pol Ⅲ转录的启动子，位于下游，在其基因编码序列内部。这种启动子，根据所转录的RNA的种类，由不同的功能区组合而构成。转录因子识别这些功能区，促进RNA聚合酶转录起始。

18S，5.8S和28S rRNA作为一个转录单位一道转录，产生前体RNA分子。大部分真核生物的18S，5-8S和28S rRNA都是以串联重复排列，每个重复单位被不转录的间隔序列（nontranscribed specer,NTs）所分隔。转录单位的启动子位于NTS中，其功能是和特异的转录因子相结合，促进核糖核酸 pol Ⅰ的转录起始。

中心法则的提出

从孟德尔定律问世以后，人们就知道了生物的各种性状是由基因控制的。一基因一酶学说的建立进一步地明确了基因是以酶的形式通过控制生化反应链来控制的。酶或蛋白和基因又是什么样的关系呢？也就是说遗传信息怎样传递，怎样表达成性状呢？就在Watson和Crick建立DNA双螺旋模型后的第三年，1957年Crick提出了中心法测（central dogma），指出了遗传信息的传递方向：

脱氧核糖核酸 → 核糖核酸→蛋白质

1970年H.Temin和D.Baltimore发现了反转录酶后，Crick对中心法测又作了部分修改：

DNA RNA →蛋白质

也就是说由DNA通过转录将遗传信息传递给RNA，RNA通过翻译把信息传递给蛋白。通过这种单向的传递，遗传信息通过蛋白质的不同形式，如酶，结构蛋白，运载蛋白，调节蛋白等表达成一种性状。

区分mRNA和转运RNA，可以从结构和功能这两个方面去把握。

mRNA的一级结构，tRNA的二级、三级结构是经常考察的内容，需要仔细区分。

⑴真核生物的mRNA的5' 端有帽子结构，3' 端为多聚腺苷酸（poly(A））尾巴。

⑵tRNA的二级结构呈车轴草属形。三叶草形结构由氨基酸臂、二氢尿嘧啶环、反密码环、额外环和TφC环等5个部分组成。其中，氨基酸臂末端为CCA；反密码环中部为反密码子，由3个碱基组成。反密码子可识别mRNA的密码子。

⑶转运RNA折叠形成三级结构。tRNA的三级结构呈倒L形，反密码环和氨基酸臂分别位于倒L的两端。

⑴mRNA是合成蛋白质的直接模板。每一种多肽链都有一种特定的m核糖核酸做模板，因此细胞内mRNA的种类也是很多的。它将脱氧核糖核酸上的遗传信息转录下来，携带到核糖体上，在那里以密码的方式控制蛋白质分子中氨基酸的排列顺序，作为蛋白质合成的直接模板。

⑵tRNA的功能是转运氨基酸。在蛋白质合成过程中，tRNA与合成蛋白质所需的单体——氨基酸形成复合物，将氨基酸转运到核糖体中mRNA的特定位置上。

简介

定义：以反义RNA为模版，通过反转录酶，进行的RNA转录

1．概念 反转录是以RNA为模板合成DNA的过程，也称逆转录。这是脱氧核糖核酸生物合成的一种特殊方式。

2．反转录酶与反转录过程

反转录过程由反转录酶催化，该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶（RDDP），即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA（cDNA）。反转录酶存在于一些RNA病毒中，可能与病毒的恶性转化有关。人类免疫缺陷病毒（HIV）也是一种RNA病毒，含有反转录酶。在小鼠及人的正常细胞和胚胎细胞中也有反转录酶，推测可能与细胞分化和胚胎发育有关。

生物学意义

反转录的发现有重要的理论意义和实践意义。

1．对分子生物学的中心法则进行了修正和补充，修正后的中心法则表示为：

2．在致癌病毒的研究中发现了癌基因，在人类一些癌细胞如膀胱癌、小细胞癌等细胞中，也分离出与病毒癌基因相同的碱基序列，称为细胞癌基因或原癌基因。癌基因的发现为肿瘤发病机理的研究提供了很有前途的线索。

3．在实际工作中有助于基因工程的实施。由于目的基因的转录产物易于制备，可将mRNA反向转录形成脱氧核糖核酸用以获得目的基因。

microRNA虽然只有19－21个核苷长度，但能够通过绑定和中和负责蛋白翻译的信使RNA，沉默大片段基因。迄今发现的microRNA已达到几百种，它们在基因组中的调节作用日益引起人们关注。

最近，Wistar研究所的研究人员发现micro核糖核酸会经历一种生理学后果严重的分子编辑过程（molecular editing），序列的一个替换会改变这些microRNA的作用靶标，抑制非预期匹配物的表达，编辑过程出错会导致严重的健康问题。详细内容刊登于2月23日《Science》杂志。

“我们发现，某些情况下已编辑的microRNA版本与未经编辑的版本只有一个核苷差异，”文章高级作者、Wistar研究所基因表达和校准程序教授 Kazuko Nishikura博士说，“这些已编辑的micro核糖核酸不是由脱氧核糖核酸编码的，意味着至少两个版本来自于同一个基因，这是未曾料到的……进一步观察，我们发现替换只出现在分子的特定关键区域，总共19或21个核苷长度分子的第7或8位核苷，这两个位点规定了靶标的特异性。提示替换可能会使已编辑的microRNA与未编辑的microRNA沉默完全不同的靶标。”

利用生物信息学工具将一种microRNA的已编辑版本和未编辑版本与已知的基因序列数据库比对，研究人员鉴别出分别是两种不同版本分子的靶标的两组完全不同的基因，并从每组中分别挑选出三个基因，进一步观察micro核糖核酸是否会改变这些基因的表达效果。

接下来，研究人员随机挑选出一个预期的靶标基因，探测microRNA的衍生物的潜能。所挑选的基因为PRPS1，其所编码的酶在尿酸合成中发挥关键作用。如果调节此酶不当，多种健康问题会接踵而来。比如，表达量过高会引起血液中尿酸水平上升，引起风湿痛；大脑中尿酸水平过高会损伤感觉神经元，引起失聪。

在不能进行RNA编辑（RNA editing）的转基因小鼠和正常小鼠身上的实验显示，完全缺乏已编辑版本microRNA的小鼠，PRPS1酶水平是对照组的2倍，尿酸水平也是对照组的2倍。

Nishikura 说这些证实，最初计算机所预测的同一基因编码的未经编辑的、已编辑的microRNA的不同靶标是正确的。至少对于PRPS1来说是正确的，未经编辑的和已编辑的microRNA的差异的生理学效果在尿酸水平的上升程度上显示出来。

即便说PRPS1基因是研究人员随机挑选的，但研究结果提示一系列其它迄今原因未明的疾病很有可能是由新发现的micro核糖核酸编辑过程引起的。

真核生物的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构（m7G）和3’端的Poly(A）尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly（A）尾，通常用Poly（A+）表示。这种结构为真核mRNA的提取，提供了极为方便的选择性标志，寡聚（dT）纤维素或寡聚（U）琼脂糖亲合层析分离纯化mRNA的理论基础就在于此。mRNA的分离方法较多，其中以寡聚（dT）-纤维素柱层析法最为有效，已成为常规方法。此法利用mRNA 3’末端含有Poly（A+）的特点，在核糖核酸流经寡聚（dT）纤维素柱时，在高盐缓冲液的作用下，mRNA被特异地结合在柱上，当逐渐降低盐的浓度时或在低盐溶液和蒸馏水的情况下，mRNA被洗脱，经过两次寡聚（dT）纤维柱后，即可得到较高纯度的mRNA。寡聚（dT）纤维素柱纯化mRNA

1．3M乙酸钠（pH 5.2) 2．0.1M 氢氧化钠 3．1×loading buffer：20mM 三羟甲基氨基甲烷HCl(pH 7.6）；0.5M NaCl；1M 乙二胺四乙酸二钠（pH 8.0）；0.1%十二烷基磺酸钠（十二烷基氨酸钠。配制时可先配制Tris-HCl(pH 7.6）、NaCl、EDTA（pH 8.0）的母液，经高压消毒后按各成分确切含量，经混合后再高压消毒，冷却至65℃时，加入经65℃温育（30min）的10%SLS至终浓度为0.1%。4．洗脱缓冲液：10mM Tris-HCl(pH 7.6）；1mM EDTA(pH 8.0）；0.05% SDS 5．无水乙醇、70%乙醇 6．DEPC

1．将0.5-1.0g寡聚（dT）-纤维悬浮于0.1M的氢氧化钠溶液中。2．用DEPC处理的1ml注射器或适当的吸管，将寡聚（dT）-纤维素装柱0.5-1ml，用3倍柱床体积的DEPC H2O洗柱。3．使用1×loading buffer洗柱，直至洗出液pH值小于8.0。4．将RNA溶解于DEPC H2O中，在65℃中温育10min左右，冷却至室温后加入等体2×上样缓冲液，混匀后上柱，立即收集流出液。当RNA上样液全部进入柱床后，再用1×上样缓冲液洗柱，继续收集流出液。5．将所有流出液于65℃加热5min，冷却至室温后再次上柱，收集流出液。6．用5-10倍柱床体积的1×上样缓冲液洗柱，每管1ml分部收集，OD260测定RNA含量。前部分收集管中流出液的OD260值很高，其内含物为无Poly(A）尾的RNA。后部分收集管中流出液的OD260值很低或无吸收。7．用2-3倍柱容积的洗脱缓冲液洗脱Poly(A+)RNA，分部收集，每部分为1/3-1/2柱体积。8．OD260测定Poly(A+)RNA分布，合并含Poly(A+)RNA的收集管，加入1/10体积3M NaAc（pH5.2）、2.5倍体积的预冷乙醇，混匀，-20℃放置30min。9．4℃离心，10000g×15min，小心吸弃上清。用70%乙醇洗涤沉淀。[注意：此时Poly(A+)RNA的沉淀往往看不到]。4℃离心，10000g×5min，弃上清，室温晾干。10. 用适量的DEPC H2O溶解RNA。

2020年12月，美国食品和药物管理局(美国食品药品监督管理局)授权一款运用mRNA(信使核糖核酸)技术研制的新型冠状病毒疫苗的紧急使用许可。 

2022年2月，南非一公司3日对当地媒体表示，该公司利用已公开的新冠疫苗核酸序列，开发出非洲大陆首款mRNA（信使核糖核酸）新冠疫苗，计划今年底前开展临床试验。

南非当地时间2022年2月4日，据南非主流媒体报道，南非生物技术公司阿菲利根(Afrigen)日前已成功研制生产出非洲大陆首个mRNA新冠肺炎疫苗，该疫苗将于2022年11月正式投入临床试验。

2022年4月29日，斯微（上海）生物科技Inc.自主研发的新冠病毒mRNA疫苗已获得国家药监局批准，将开展临床试验。

2022年9月，俄勒冈州立大学和俄勒冈卫生科学大学研究人员开发出了首个用于治疗卵巢癌以及恶病质的信使核糖核酸（mRNA）疗法。他们在实验小鼠身上开展了相关研究并取得了成功。

1．整个实验过程必须防止Rnase的污染。2．步骤⑷中将RNA溶液置65℃中温育然后冷却至室温再上样的目的有两个，一个是破坏RNA的二级结构，尤其是mRNA Poly(A+）尾处的二级结构，使Poly(A+）尾充分暴露，从而提高Poly(A+)RNA的回收率；另一个目的是能离解mRNA与rRNA的结合，否则会导致rRNA的污染。所以此步骤不能省略。3．十二烷基肌氨酸钠盐在18℃以下溶解度下降，会阻碍柱内液体流动，若室温低于18℃最好用LiCl替代NaCl。4．寡聚（dT）-纤维素柱可在4℃贮存，反复使用。每次使用前应该依次用氢氧化钠、灭菌 ddH2O、loading buffer洗柱。5．一般而言，107哺乳动物培养细胞能提取1-5μg Poly(A+)RNA，约相当于上柱总RNA量的1%-2%。